一种抗草甘膦基因的发现和抗草甘膦转基因水稻的培育

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一种抗草甘膦基因的发现和抗草甘膦转基因水稻的培育

     论文目录

致谢第1-6页

摘要第6-8页

Abstract第8-14页

第一章 综述第14-36页

 1 草甘膦的生产及其发展第14-15页

 2 草甘膦性质及作用机理第15-20页

   ·草甘膦的理化性质第15-16页

   ·草甘膦作用特点第16-18页

     ·良好的内吸性和极宽的杀草谱第16页

     ·不易产生抗药性第16-18页

     ·安全、无害第18页

   ·草甘膦毒性机理第18-20页

 3 生物抗草甘膦的机理第20-22页

 4 草甘膦靶标酶EPSPS的研究现状第22-28页

   ·EPSPS的分类第22页

   ·EPSPS定位第22-23页

   ·EPSP合成酶的三维结构与活性区第23-26页

   ·EPSPS基因的克隆及分子生物学研究第26-28页

 5 抗草甘磷转基因作物的选育途径及研究进展第28-32页

   ·转基因的概念第28-29页

   ·抗草甘膦转基因作物的选育途径第29-30页

   ·抗草甘膦转基因作物的研究进展第30-32页

 6 抗草甘磷转基因水稻的研究现状第32-36页

   ·植物遗传转化方法及特点第33-36页

     ·农杆菌介导的基因转移第34页

     ·基因枪介导的基因转移第34-35页

     ·PEG介导的基因转移第35页

     ·花粉管导入法介导的基因转移第35-36页

第二章 抗草甘膦G6基因的克隆、表达及草甘膦抑制下生长曲线的建立第36-79页

 1 实验材料与方法第36-47页

   ·实验材料第36-38页

     ·土壤样品第36页

     ·工具酶及试剂盒第36页

     ·菌株和载体第36-37页

     ·培养基第37页

     ·SDS-PAGE电泳分析所用的试剂第37页

     ·Western blot分析所用的试剂第37页

     ·酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所用的试剂第37-38页

     ·其它试剂第38页

     ·实验动物第38页

   ·实验方法第38-47页

     ·菌株的分离与纯化第38-39页

     ·菌株的鉴定第39-40页

     ·抗草甘膦G6基因的克隆第40-44页

     ·抗草甘膦G6基因的原核表达和草甘膦抑制下生长曲线的建立第44-46页

     ·目的蛋白的纯化回收及抗体制备第46-47页

 2 结果与分析第47-77页

   ·菌株的鉴定第47-50页

     ·16S rDNA鉴定第47-50页

     ·G6菌株的电镜观察第50页

   ·G6基因的扩增第50-53页

   ·G6蛋白的生物信息学分析第53-69页

     ·G6蛋白一级结构分析第53-65页

     ·G6蛋白二级结构分析第65页

     ·G6蛋白质三级结构分析第65-69页

   ·抗草甘膦G6基因的原核表达和草甘膦抑制下生长曲线的建立第69-75页

     ·原核表达载体的构建第69-70页

     ·草甘膦抑制下生长曲线的建立第70-74页

     ·G6原核表达和SDS-PAGE分析第74-75页

   ·目的蛋白的纯化和抗体的制备第75-77页

     ·目的蛋白的纯化第75-76页

     ·抗体的制备和效价检测第76-77页

 3 讨论第77-79页

第三章 抗草甘膦转基因水稻的培育第79-97页

 1 材料和方法第79-89页

   ·材料第79-80页

     ·植物材料第79页

     ·菌株和质粒第79-80页

     ·试剂与仪器第80页

     ·实验用溶液的配制第80页

   ·方法第80-89页

     ·植物表达载体的构建第80-84页

     ·农杆菌感受态的制备和转化第84-85页

     ·水稻的转化第85-86页

     ·植物总DNA提取(CTAB法)第86-87页

     ·转G6抗草甘膦基因植株的PCR鉴定第87页

     ·Western blot分析第87-88页

     ·Southern印迹分析第88页

     ·T_0和T_1转基因水稻抗性实验第88-89页

 2 结果与分析第89-96页

   ·载体构建第89-90页

   ·抗草甘膦转基因植株的获得第90-91页

   ·T_0代抗草甘膦植株的PCR检测第91-92页

   ·T_0代抗草甘瞵植株的Western blot检测第92-93页

   ·T_0代抗草甘膦植株的Southern blot检测第93页

   ·T_0代转基因水稻抗性实验第93-95页

   ·T_1代转基因水稻抗性实验第95-96页

 3 讨论第96-97页

总讨论第97-98页

参考文献第98-109页

缩写与中英文对照第109-110页

附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器第110-112页

附录B 实验用溶液及培养基配方第112-115页

论文编号BS782336，这篇论文共115页
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