橘色双冠丽鱼TYR基因的克隆及其发育时序和组织表达分析

发布时间：2017-11-06 08:34

  本文关键词：橘色双冠丽鱼TYR基因的克隆及其发育时序和组织表达分析

  更多相关文章： 橘色双冠丽鱼 酪氨酸酶基因(TYR) qRT-PCR 黑色素细胞

【摘要】：酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)是动物体内黑色素合成信号通路中起关键性作用的限速酶,黑色素生成的速度和种类取决于TYR基因的表达量和活性水平。为了解色素相关基因与体色变化的关系,采用cDNA末端快速克隆(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术获得橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)TYR基因cDNA全序列,并利用qRT-PCR分析了橘色双冠丽鱼体色变化不同时期和不同组织中TYR基因的表达差异。实验获得c DNA全长序列2 683 bp,其中阅读框1 620 bp,编码540个氨基酸,5'UTR区246 bp,3'UTR区817 bp。氨基酸序列和系统发育分析表明,相比与脊椎动物间的保守性,TYR蛋白序列在鱼类间的保守性更高。qRT-PCR结果表明,TYR基因在胚胎各期均有表达,受精期表达量最低,血液循环期开始急速上升;在"黑色-灰色-亮黄色"三个典型体色褪黑过程中,各组织TYR基因表达量均在黑色期呈现最高值,显著高于灰色和亮黄色期,灰色到亮黄色时期鳞片和尾鳍的TYR基因表达量逐渐降低,但差异不显著(P0.05),而皮肤组织的TYR基因表达量在三个体色褪黑期均显著降低(P0.05);亮黄色时期,TYR基因在心、肾、脑、鳔、性腺、尾鳍和眼等组织均有表达,其中眼部表达量最高,其次是鳔和尾鳍,皮肤和性腺表达量最低。橘色双冠丽鱼TYR基因在三个典型体色褪黑期表达逐渐降低,可能与红色素细胞和黄色素细胞逐渐增多以及黑色素细胞数量和分布比例发生变化相关。本研究通过了解体色变异的分子基础,为鱼类体色遗传和体色改良研究积累资料。
【作者单位】： 中国水产科学研究院珠江水产研究所/农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室;上海海洋大学水产与生命学院;
【基金】：广东省自然科学基金(No.2015A030313700) 广东省科技计划(No.2013B020401004) 国家科技基础条件平台子项目(No.2015DKA30470)
【分类号】：S917.4
【正文快照】： 体色是鱼类独特的表型性状和经济性状(Nils-son Sk?ld et al.,2013)。观赏鱼类的体色和斑纹直接决定其观赏价值和市场价值。许多鱼类从仔鱼到幼鱼阶段都存在一个重要的“体色褪黑”现象,如金鱼(Carassius auratus)、日本锦鲤(Cyprinus carpio)、小丑鱼(Amphiprion frenatus)等

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