猪PPARΓ2基因肌肉超表达真核表达载体构建以及在转基因小鼠中的功能验证

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猪PPARΓ2基因肌肉超表达真核表达载体构建以及在转基因小鼠中的功能验证

     论文目录

摘要第1-10页

Abstract第10-13页

縮略词表第13-15页

第一章 文献综述第15-34页

   ·转基因动物研究方法与应用第15-19页

     ·转基因动物制备方法第15-17页

     ·转基因动物的应用第17-19页

     ·展望第19页

   ·肌内脂肪候选基因研究第19-27页

     ·脂肪酸合成酶(Fatty acid synthetase,FAS)第20-21页

     ·激素敏感脂酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)第21页

     ·脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)第21-22页

     ·二酯酰甘油酰基转移(diaeylglyeerolaeyltransferas,DGAT)第22-24页

     ·脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding proteins,FABP)第24-26页

     ·CD36第26-27页

   ·PPARγ第27-34页

     ·PPARγ概述第27-34页

第二章 pEGFP-N1L-MCK-sPPARγ2真核表达载体的构建第34-53页

   ·研究目的第34页

   ·材料与方法第34-36页

     ·主要仪器设备第34页

     ·主要试剂与试剂盒第34-35页

     ·主要溶液配方第35-36页

     ·使用主要载体第36页

   ·实验方法第36-45页

     ·pEGFP-N1L-Tyb12载体的构建第36-41页

     ·pEGFP-N1L-sMCK载体的构建第41-43页

     ·最终载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的构建第43-45页

   ·实验结果第45-51页

     ·pEGFP-N1L-Tyb12载体的构建第45-47页

     ·载体pEGFP-N1L-sMCK的构建第47-48页

     ·最终载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2的构建第48-51页

   ·讨论第51-53页

第三章 转基因细胞系建立与检测第53-67页

   ·实验目的第53页

   ·实验材料第53-54页

     ·实验动物第53页

     ·仪器设备第53页

     ·主要试剂和试剂盒第53-54页

     ·主要试剂的配制第54页

   ·实验方法第54-60页

     ·猪35日龄胚胎成纤维细胞培养建系第54-55页

     ·质粒大量提取第55-56页

     ·细胞转染实验第56-60页

   ·结果与分析第60-64页

     ·成纤维细胞原代培养第60页

     ·瞬时转染猪胚胎成纤维细胞检测和转染C2C12细胞检测第60-62页

     ·稳定转染C2C12细胞检测第62-64页

   ·讨论第64-67页

     ·关于成纤维细胞原代培养第64页

     ·关于载体的转染实验第64-67页

第四章 转基因小鼠制备与表达检测第67-93页

   ·实验目的第67页

   ·实验材料第67-70页

     ·实验动物第67页

     ·主要仪器第67页

     ·主要试剂与试剂盒第67-68页

     ·主要试剂配方第68-69页

     ·主要生物学网站以及分析软件第69页

     ·主要引物设计第69-70页

   ·试验方法第70-78页

     ·转基因小鼠获取和鉴定第70页

     ·转基因小鼠PPARγ2的组织表达检测第70-73页

     ·Western Blot第73-74页

     ·检测PPARγ2上调对组织相关基因表达的影响分析第74-75页

     ·转基因小鼠部分生化指标测定第75-78页

   ·实验结果第78-84页

     ·转基因小鼠F1代检测第78页

     ·转基因小鼠F1代PPARγ2组织表达检测第78-79页

     ·PPARγ2上调对组织相关基因表达以及生化指标的影响分析第79-82页

     ·转基因小鼠部分生理生化指标测定第82-84页

   ·讨论第84-93页

     ·转基因小鼠检测第84-86页

     ·超表达PPARγ2对骨骼肌的影响第86-89页

     ·超表达PPARγ2对皮下脂肪的影响第89-91页

     ·超表达PPARγ2对肝脏的影响第91-93页

第五章 结论第93-95页

   ·主要研究成果第93页

   ·主要创新点第93-94页

   ·研究的不足之处第94-95页

参考文献第95-113页

附录1 载体pEGFP-N1L-MCK-PPARγ2序列第113-117页

附录2 引物第117-119页

在读期间发表文章情况第119-120页

致谢第120-121页

论文编号BS12426，这篇论文共121页
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