白木香AsJAZ1基因原核载体的构建与表达

发布时间：2017-11-12 00:14

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【摘要】：克隆国产沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis jasmonate-zim-domain protein(As JAZ1)基因的编码区,构建原核表达载体及诱导重组蛋白的表达,为筛选互作蛋白因子和研究基因功能奠定基础。该实验以白木香叶片中分离的总RNA为模板,通过RT-PCR方法克隆到茉莉酸信号转导抑制蛋白基因JAZ(As JAZ1)的编码区全长序列,克隆到原核表达载体p ET-28a上,构建重组原核表达载体p ET-28a-As JAZ1,经酶切鉴定和测序验证后将其转入大肠杆菌BL21(DE3),在37℃经0.5 mmol·L-1异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达4 h后,可获得相对分子质量约为39 k Da的融合重组蛋白的高效表达。该重组蛋白在大肠杆菌的上清和沉淀中均有表达,但以包涵体表达为主。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所;中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所;
【基金】：国家自然科学基金项目(81173481;31100220;31000136) 协和学者特聘教授项目(医科人发【2012】282号)
【分类号】：S567.19
【正文快照】： 沉香是我国传统中药,其味辛、苦,性微温,具行气止痛、温中止呕、纳气平喘等功效[1]。白木香Aq-uilaria sinensis(Lour)Gilg,是我国生产沉香的唯一正品植物来源[2]。白木香是一种典型的伤害诱导型药用植物,其只有受到伤害才能产生沉香[3-4],同时沉香的产生也被认为是白木香树防

【参考文献】

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 张兴丽;伤害诱导的白木香防御反应与沉香形成的关系研究[D];北京林业大学;2013年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 廖永翠;徐艳红;张争;隋春;梁良;魏建和;;白木香AsNINJA1基因全长cDNA克隆及其在愈伤组织中的茉莉酸甲酯诱导表达[J];中草药;2014年20期

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1 廖永翠;茉莉酸信号途径参与调控沉香倍半萜生物合成的分子机制研究[D];北京协和医学院;2015年

2 刘娟;程序性细胞死亡与沉香倍半萜次生代谢关系的探索研究[D];北京协和医学院;2015年

【二级参考文献】

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4 程水源,陈昆松,刘卫红,杜何为;植物苯丙氨酸解氨酶基因的表达调控与研究展望[J];果树学报;2003年05期

5 兰芹英,方春妍,何惠英,程治英;土沉香成熟胚的组织培养及植株再生[J];广西农业生物科学;2001年03期

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【相似文献】

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1 张玉臣;周再知;梁坤南;马华明;黄桂华;;珍贵树种白木香研究现状与展望[J];安徽农业科学;2010年03期

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5 赵，

本文编号：1173498