普通小麦TaSEC14p-5基因的克隆及表达分析

发布时间：2017-11-13 04:28

  本文关键词：普通小麦TaSEC14p-5基因的克隆及表达分析

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【摘要】：磷脂酰肌醇转运蛋白Sec14是最先在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中发现的磷脂酰肌醇转运蛋白,含有一个典型的SEC14保守结构域。Sec14p磷脂酰肌醇转运蛋白广泛存在于真核生物细胞中,并参与膜运输途径、质膜发育、脂肪酸代谢、根毛的生长等生命活动,但未见此蛋白在作物逆境胁迫的有关报道。为研究Sec14p基因在小麦(Triticum aestivum)发育及逆境胁迫中的功能,本研究采用电子克隆方法从小麦京花9号中得到一个Sec14p基因,命名为Ta SEC14p-5(Gen Bank登录号:KU639968)。氨基酸序列分析表明,该基因ORF全长为984 bp,编码327个氨基酸,相对分子质量为37.1 k D,理论等电点为7.70。在植物中该蛋白有典型的SEC14类基因家族保守域SEC14和一个CRAL_TRIO_N结构域。进化和聚类分析表明,小麦Ta SEC14p-5基因与粗山羊草(Aegilops tauschii)磷脂酰肌醇转运蛋白Ae SEC14p基因和水稻(Oryza sativa)磷脂酰肌醇转运蛋白Os02g0200000基因亲缘关系较近,蛋白相似度分别为96.45%和88.38%。采用q RT-PCR技术,对小麦孕穗期不同组织和不同非生物胁迫幼苗进行表达分析。发现该基因在根、茎、叶、颖壳、雄蕊和种子中均有表达,且在茎中表达量较高,雄蕊次之,根最低;该基因受高盐的强烈诱导,同时也受到脱落酸(abscisic acid,ABA)(200μmol/L)、干旱(PEG6000)和低温(4℃)不同程度的胁迫诱导。Ta SEC14p-5在Na Cl、ABA、PEG和4℃四种不同胁迫处理下,总体趋势为先上升后下降。结果推测,Ta SEC14p-5基因可能参与了Na Cl、ABA、PEG6000和4℃等不同程度的非生物胁迫处理,为进一步改良小麦抗逆性等分子机理研究提供了新的依据。
【作者单位】： 河北科技师范学院生命科技学院;北京市农林科学院杂交小麦工程技术研究中心;首都师范大学生命科学院;
【基金】：北京市农林科学院科技创新能力建设专项(No.KJCX20140202);北京市农林科学院青年基金(No.QNJJ201307) 国家自然科学基金(No.31571744)
【分类号】：S512.1
【正文快照】：

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本文编号：1179115