水稻OsHsfA2e基因的克

发布时间：2017-11-13 05:11

  本文关键词：水稻OsHsfA2e基因的克隆、遗传转化与功能分析

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【摘要】：水稻是最重要的粮食作物之一,但近年来,因全球气候变暖,气温升高,农作物频繁的遭受热害,尤其是水稻。研究发现,高温会影响水稻的生长发育与产量,极端温度甚至会导致水稻死亡。而热激转录因子可以激发植物体内的热激反应,以应对高温胁迫。水稻体内有26个热激转录因子,我们利用Q-PCR技术、转基因技术以及生理生化技术对水稻体内热激转录因子OsHsfA2e的功能做了系统的研究,研究结果如下:(1)利用Q-PCR技术,在热激条件下,发现OsHsfA2e基因在转录水平上对高温的响应迅速且猛烈,可以在1h内达到94倍。(2)构建了绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,应用亚细胞定位技术对OsHsfA2e蛋白进行定位,试验结果表明,OsHsfA2e蛋白定位于细胞核上,是作为核调控因子发挥作用的。(3)通过Gateway技术,成功获得了OsHsfA2e基因的过表达株系,并扩繁至T3代。(4)通过热处理下对OsHsfA2e基因过表达株系和野生型株系Kitaake的表型分析发现,当遭受热胁迫时,过表达株系茎叶的生长状况比野生型株系要健壮,基本不发生萎蔫,而野生型株系萎蔫状况颇为严重,说明过表达株系的耐热性比野生型的耐热性好,证明OsHsfA2e基因可以提高植株的耐热性。(5)通过热处理下对过表达株系和野生型株系茎叶生理指标的测量发现,当遭受热胁迫时,除茎中H2O2含量的升高速率保持一致外,过表达株系体内的H2O2的含量,POD活性,SOD活性的升高速度较野生型快,;而叶绿素的降低速度较野生型的慢,始终维持在一个较高的水平。再一次从生理水平上证明了,过表达株系的耐热性比野生型株系的耐热性好。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S511

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本文编号：1179223