HPV16E5、E6和E7基因重组慢病毒载体的构建及其感染口腔上皮细胞

发布时间：2017-11-14 02:29

  本文关键词：HPV16E5、E6和E7基因重组慢病毒载体的构建及其感染口腔上皮细胞

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【摘要】：目的分别构建HPV16 E5、E6和E7癌基因的重组慢病毒载体感染人口腔上皮细胞,为研究E5基因对口腔上皮细胞的致癌机制奠定基础。方法克隆HPV16 E5、E6和E7基因,分别构建p LVX-Ac GFP-E5、p LVX-Ac GFP-E6和p LVX-Ac GFP-E7重组慢病毒载体,与包装质粒共转染293T细胞。收集3种慢病毒上清液,分别感染口腔上皮细胞、腺嘌呤素筛选感染细胞,RT-PCR和Western blot法检测目的基因的表达。结果成功构建p LVX-Ac GFP-E5、p LVX-Ac GFPE6和p LVX-Ac GFP-E7重组慢病毒载体,获得3种慢病毒上清液,筛选得到3个稳定的细胞株。RT-PCR和Western blot均可检测到HPV16 E5、E6和E7基因在口腔上皮细胞内表达。结论本研究构建的3个重组慢病毒载体能成功感染口腔上皮细胞。
【作者单位】： 安徽医科大学第三附属医院;安徽农业大学植物保护学院;皖南医学院口腔医学院;
【基金】：国家自然科学基金资助项目(编号:81172574) 皖南医学院人才引进科研启动基金资助
【分类号】：R737.33
【正文快照】： 2016-03-08接收人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是宫颈癌发生的主要致病因子。大量的流行病学调查资料显示,HPV也与口腔癌的发生密切相关[1-2]。目前关于HPV与口腔癌关系的研究主要集中于对高危型HPV E6和E7基因的研究,它们都可与肿瘤抑制物结合并使其失活[3]。实际

【相似文献】

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1 侯潇潇;HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞E6/E7基因表达的影响[D];安徽医科大学;2011年

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本文编号：1183487