表达外源DsCOR转基因拟南芥的筛选及其抗寒性

发布时间：2017-11-17 04:03

  本文关键词：表达外源DsCOR转基因拟南芥的筛选及其抗寒性

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【摘要】：为验证播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能,在实验室前期DsCOR基因大量研究的基础上,本研究通过农杆菌介导花序浸染法把诱导型表达载体PBI121-DsCORpro681-DsCOR转入COR15a缺陷型拟南芥中(A-S),筛选获得转DsCOR基因阳性苗(A-I),并测定了A-I、A-S和野生型(A-W)拟南芥在4℃低温胁迫下的叶片脯氨酸含量、电解质渗透率和幼苗在-4℃下存活率等抗寒生理指标;使用Real-time quantitative RT-PCR检测A-I在低温胁迫下DsCOR基因的表达规律.结果显示,A-W和A-I两种植株叶片脯氨酸含量在低温处理过程中显著增加,从处理前70μg g~(-1)到处理后12h分别升至453μg g~(-1)和406μg g~(-1)并趋于稳定,A-S叶片脯氨酸含量变化不大(30~(-1)05μg g~(-1)).随着处理时间增加,A-S叶片电解质渗透率升高较明显,36 h后达到45.2%;而A-W和A-I两种植株叶片电解质渗透率最高分别达到14.3%和16.3%.幼苗存活率统计结果显示,A-S缺失COR15a后,在-4℃处理后该株系幼苗全部死亡,而A-W和A-I两个株系都有较高的存活率,分别达到53%和83%.抗寒生理指标结果表明转DsCOR基因拟南芥的抗寒能力已得到显著提高,达到野生型拟南芥水平.Real-time quantitative RT-PCR检测显示DsCOR基因在A-I中表达明显受到低温胁迫诱导.综上,DsCOR基因在COR15a缺陷型拟南芥中实现了成功表达,并显著提高了其抗寒性,最终验证了播娘蒿抗寒基因DsCOR的抗寒功能.
【作者单位】： 四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室;
【基金】：国家“十二五”科技支撑计划项目(2013BAD10B01,2014BAD02B02) 国家自然科学基金项目(311714 47) 四川省科技厅项目(2014GZX0005,2012GZ0008,2013HH0007,2013GZX0161-3,2014JCPT0005)资助~~
【分类号】：Q945.78
【正文快照】： CLC Q945.78:Q78温度是影响植物生长的重要的外界条件之一,低温环境会对植物生长发育产生严重的制约作用.因此通过研究植物抗寒性,改良植物抗寒基因以培育优良抗寒植物具有非常重要的意义.生活在寒冷高原上的一些植物其本身就具有极强的耐寒性,如播娘蒿Descuminia sophia[1],

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本文编号：1194706