实时定量PCR 检测转基因水稻科丰6 号插入拷贝数和转基因含量.pdf 全文免费

  本文关键词：实时定量PCR检测转基因水稻科丰6号插入拷贝数和转基因含量，由笔耕文化传播整理发布。

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基金项目: 转基因重大专项转基因水稻核酸精准检测技术研究(No.2008ZX08012001-002)收稿日期:2011-07-29接受日期:2011-09-22研究报告Letter?实时定量PCR检测转基因水稻科丰6号插入拷贝数和转基因含量王渭霞赖凤香洪利英傅强*中国水稻研究所, 杭州310006*通讯作者,qiangfu1@摘要建立转基因成分灵敏、准确的定量标识是实施转基因安全阈值管理的一个基本步骤, 其中实时定量PCR技术是检测产品中转基因含量的主要技术方法。本研究利用该技术确定了双价(cry1Ac+CpTi)转基因抗虫水稻(Oryzasativa)科丰6?号中有3个拷贝的外源基因插入。通过对外源基因Bt?和转化事件特异的边界特异序列为对象的绝对定量和相对定量检测方法的研究,发现以边界特异序列为对象的事件特异性检测和以目的基因Bt?为对象的检测都能够满足相对定量检测的要求。在100ng基因组DNA?中,Bt?基因和特异性检测的相对定量检测限分别为0.1%和0.5%, 在绝对定量检测中, 特异性检测的检测限为5?个拷贝。不同检测方法对4?个已知转基因含量的样品检测结果与预期均一致。结果表明, 以转基因产品占总产品比例为定义的转基因含量的测定中,多拷贝或单拷贝基因为对象的不同定量方法的检测对转基因产品的相对定量结果没有影响, 本研究对... 内容来自转载请标明出处.

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