紫苏FAD3基因RNA干扰载体的构建及遗传转化

发布时间：2017-11-20 06:09

  本文关键词：紫苏FAD3基因RNA干扰载体的构建及遗传转化

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【摘要】：本研究利用RNA干扰的方法抑制紫苏ω-3脂肪酸脱氢酶基因FAD3的表达,以期得到低ALA含量的转基因植株。根据紫苏FAD3基因(Gen Bank登录号为KC990786.1)序列设计含有不同酶切位点的特异性扩增引物,通过扩增获得长度为258 bp的RNA干扰片段,构建以Ca MV35S启动子驱动表达的紫苏FAD3基因RNA干扰表达载体p FGC5941M-FAD3I,将该载体转入根癌农杆菌GV2301后,采用农杆菌介导法进行紫苏的遗传转化,经除草剂抗性筛选和PCR检测获得1株阳性转基因植株。利用荧光定量PCR技术对野生型和转基因阳性苗的FAD3基因进行了表达分析,结果显示,阳性植株中FAD3基因的表达受到显著抑制,FAD3基因表达量降低了80%,说明此研究构建的FAD3基因RNA干扰载体对该基因表达沉默是有效的,为FAD3基因在不饱和脂肪酸代谢过程中的功能研究提供了理论依据。
【作者单位】： 重庆师范大学生命科学学院重庆市植物环境适应分子生物学重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(31171588)资助
【分类号】：S565.9;Q943.2
【正文快照】： Construction of the RNAi Vector of FAD3 Gene and Its GeneticTransformation in Perilla FrutescensHuang Xinglin Gao Tianshu Lu Jun Xing Bai Ruiying Zhang Tao*College of Life Sciences,Chongqing Normal University,Chongqing Key Laboratory of Molecular Biology

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本文编号：1206332