发状念珠藻过氧化物还原酶NfPrx基因的克隆与表达分析

发布时间：2017-11-20 07:22

  本文关键词：发状念珠藻过氧化物还原酶NfPrx基因的克隆与表达分析

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【摘要】：过氧化物还原酶(peroxiredoxin,Prx)属抗氧化蛋白超家族,为了探究Prx在发状念珠藻抗逆过程中所具有的生物学功能,从发状念珠藻细胞中克隆了NfPrx基因的完整开放阅读框(ORF),并对基因序列特征进行了生物信息学分析,根据氨基酸序列预测了该蛋白的三维结构,在此基础上构建了基因的融合表达载体并诱导其表达,同时探讨了PEG-6000胁迫下NfPrx的表达特性。结果表明,NfPrx包含612 bp的ORF,编码203个氨基酸,NfPrx具有PRX_Typ2cys结构域,属于硫氧还蛋白超基因家族,与点形念珠藻、丝状蓝藻7507、微毛藻7126、池生念珠藻CENA21等物种的Prx氨基酸序列一致性高达94%以上。NfPrx与点形念珠藻处在同一进化枝上,具有较近的亲缘关系。利用所构建的原核表达载体,经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳,证实诱导表达的NfPrx蛋白与预期结果大小一致。qRT-PCR分析结果显示,NfPrx的表达随干旱胁迫程度的增加先增后降,PEG-6000浓度为8%时,表达量达到峰值,根据表达特性,推测过氧化物还原酶可能参与响应发状念珠藻逆境胁迫过程。
【作者单位】： 宁夏大学生命科学学院西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31360025、31260023、31360361和31560418)~~
【分类号】：Q943.2
【正文快照】： 收稿2016-06-07修定2016-07-20资助国家自然科学基金(31360025、31260023、31360361和31560418)。当生物在遭受生物和非生物胁迫后,会导致体内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量增加,对细胞造成伤害,从而影响细胞的生长(张海燕等2009)。生物在进化过程中形成了一套完

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本文编号：1206543