太子参3个肌动蛋白基因片段的克隆与序列分析

发布时间：2017-11-25 09:04

  本文关键词：太子参3个肌动蛋白基因片段的克隆与序列分析

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【摘要】：目的克隆太子参肌动蛋白(Actin)基因片段并进行序列分析。方法利用植物Actin基因的保守序列设计简并引物,通过RT-PCR和抑制PCR扩增太子参Actin基因核心片段。利用半定量RT-PCR分析太子参Actin基因在不同种源、不同器官、不同生长发育时期的表达情况。结果通过RT-PCR获得3条太子参Actin基因的核心片段,长度均为760 bp,依次命名为PhACT1、PhACT2、PhACT3。通过抑制PCR及序列拼接后3条核心片段依次延长至1 008、1 008、975 bp,分别编码336、336、325个氨基酸残基。半定量RT-PCR分析表明PhACT2和PhACT3基因在不同种源、不同器官、不同生长发育时期的表达量基本恒定,PhACT1基因存在一定的差异。结论首次从太子参中克隆得到3条太子参Actin基因序列,并确定PhACT2基因适合作为太子参功能基因表达分析的内参基因。
【作者单位】： 贵阳中医学院;
【基金】：国家自然科学基金项目(81460579) 贵州省普通高等学校特色重点实验室建设项目(黔教合KY字[2013]108号) 施秉中药材产业科技合作专项计划项目[施中药科合专项(2014)第6号] 贵州省研究生工作站建设项目(黔教研合JYSZ字[2014]016)
【分类号】：S567.53;Q943.2
【正文快照】： 基因表达分析是了解植物功能基因的表达规律,解析植物复杂代谢网络并对其进行表达调控的重要手段之一[1]。通过实时荧光定量PCR获得目的基因的相对表达量是目前最为常用的基因表达检测方法。因此,从植物中筛选出在不同器官、不同发育时期表达基本恒定的管家基因作为研究的内参

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