黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析

发布时间：2017-11-28 07:35

  本文关键词：黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析

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【摘要】：以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus niger(Gen Bank登录号JX982101.1)同源性达到了99%;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 k D,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白p NPG酶活为5.847U/m L,最适反应温度为50℃,最适p H值为5.0。
【作者单位】： 中南林业科技大学生命科学与技术学院;
【基金】：湖南省教育厅科学研究重点项目(13A123) 中南林业科技大学研究生科技创新基金项目(CX2014B30)
【分类号】：Q936
【正文快照】： 纤维二糖酶又称为β-葡萄糖苷酶[1],能够水解纤维二糖产生两分子的葡萄糖[2],并能极大地促进内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶的水解作用,加快纤维素酶系的整体水解速度,促使纤维素的水解更完全[3]。现在对真菌中纤维二糖酶产生菌研究较多的是丝状真菌,主要为曲霉属和木霉属[4],而

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