斑节对虾泛素融合蛋白UbS27基因克隆与表达分析
本文关键词:斑节对虾泛素融合蛋白UbS27基因克隆与表达分析
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【摘要】:从构建的斑节对虾(Penaeus monodon)肝胰腺转录组数据中筛选出泛素核糖体融合蛋白Ub S27基因(ubiquitin/ribosomal S27 fusion protein,Pm Ub S27)片段,利用SMART-RACE技术克隆出Pm Ub S27基因c DNA全长,并利用软件对其结构进行分析;利用实时荧光定量技术检测Pm Ub S27基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果显示,Pm Ub S27基因c DNA全长为514 bp,开放阅读框465 bp,编码154个氨基酸,含有泛素(1~72 aa)和核糖体蛋白(101~147 aa)2个结构域。以DNA为模板克隆得到的基因序列由3个内含子和4个外显子组成。实时荧光定量结果显示,Pm Ub S27基因在斑节对虾各组织中均有表达,但是在卵巢中表达量最高,其次为肝胰腺、血淋巴和精巢。Pm Ub S27在卵巢发育前期(Ⅱ期)和成熟期(Ⅴ期)的表达量显著高于其他各期(P0.05)。结果表明,Pm Ub S27参与斑节对虾卵巢发育的过程并可能在卵巢发育进程中起到重要的调控作用。
【作者单位】: 中国水产科学研究院南海水产研究所农业部南海渔业资源开发利用重点实验室;上海海洋大学水产与生命学院;华南农业大学动物科学学院;
【基金】:现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-47) 国家自然科学基金项目(210202019) 广东省科技计划项目(2013B020201001,2013B040402016) 海南省自然科学基金项目(313116) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目(2012TS27,2014TS12)
【分类号】:S917.4
【正文快照】: 泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin/proteasome path-way,UPP)是由以色列科学家HERSHKO、CIECH-ANOVER和美国科学家ROSE发现的泛素调节蛋白质降解的途径[1]。在UPP途径中泛素通过分别与泛素激活酶(E1)、泛素结合酶(E2)、泛素连接酶(E3)之间进行一系列级联反应,最后以单体或不同结构
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