葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系

发布时间：2017-12-01 14:06

  本文关键词：葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系

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【摘要】：目的研究葛根素作用于成骨细胞MC3T3-E1后miRNA表达的变化以及与Runx2基因表达的关系。方法 RT-PCR和western blot法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平;miRNA表达谱检测葛根素作用于成骨细胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、Pic Tar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA;RT-PCR测定miRNA-204表达量;构建Runx23’UTR/突变型Runx2 3’UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor转染MC3T3-E1细胞,RT-PCR和western blot检测转染前后Runx2的mRNA表达量和蛋白表达量的变化。结果与空白组比较葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表达均上升;miRNA-204表达水平下降;表达谱和靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;过表达miRNA-204后Runx2的蛋白表达水平下降,干扰miRNA-204表达后Runx2的蛋白水平上升。结论葛根素在成骨细胞中可通过调节靶向Runx2基因的miRNA-204来促进细胞增值分化。
【作者单位】： 南京中医药大学基础医学院生物教研室;
【基金】：江苏省科技厅项目(BK20131417)
【分类号】：R285
【正文快照】： 骨质疏松症(osteoporosis,OP)是一种因骨量低下、骨微结构破坏,导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨病(世界卫生组织,WHO)[1],是由于成骨细胞(OB)形成的新骨量少于被破骨细胞(OC)吸收的旧骨量,骨代谢从而发生负平衡,导致骨总量丢失所致。Runx2是骨发育过程中激活与启

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