中国水仙NtSAMT基因的克隆及转化金鱼藤

发布时间：2017-12-01 18:36

  本文关键词：中国水仙NtSAMT基因的克隆及转化金鱼藤

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【摘要】：本研究以中国水仙花瓣总RNA为模板进行反转录PCR,扩增得到与预期大小相同的PCR产物带,回收反转录PCR产物,将其与p EASY-T1克隆载体连接并导入大肠杆菌DH5α进行克隆,经菌落PCR和双酶切鉴定,筛选带有目的基因的重组质粒并进行测序。测序结果表明中国水仙花香基因SAMT c DNA的ORF片段1 131 bp编码376个氨基酸残基,与已报导的中国水仙SAMT(JX273470)的同源性为99.2%。将目的基因片段与PBI121表达载体连接,并利用农杆菌介导法将Nt SAMT基因转化到金鱼藤(Asarina procumbens)中,以金鱼藤无菌苗茎段为遗传转化外植体,通过抗性筛选获得12株转化植株,对获得的12株疑似转基因植株进行PCR检测,其中有8株呈阳性;通过RT-PCR检测得到的阳性植株,其中有5株呈阳性。检测结果表明,该研究成功克隆水仙花Nt SAMT基因并在金鱼藤植物中得到表达。
【作者单位】： 东北农业大学园艺学院;
【基金】：中国黑龙江省省教育厅项目(12531014)资助
【分类号】：S682.21
【正文快照】： 花香在植物生长发育过程中起着重要的作用,同时它还可以提高植物的观赏价值,近几年随着分子生物学的发展,花香分子水平的研究已成为一大热点。中国水仙(Narcissus tazetta L. var. chinensis roem)为石蒜科水仙属植物,多年生草本,是我国传统十大名花之一,冬季开放,香味浓郁,观

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本文编号：1242084