渗透压调控启动子表达木糖醇脱氢酶基因XYL2对重组酿酒酵母木糖代谢的影响

发布时间：2017-12-03 06:19

  本文关键词：渗透压调控启动子表达木糖醇脱氢酶基因XYL2对重组酿酒酵母木糖代谢的影响

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【摘要】：渗透压调控启动子在高底物浓度或盐类物质诱导下可实现目标基因的高表达和可控表达,因此可用于构建新的代谢工程菌株.利用来源于可耐高渗的产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)的渗透压调控启动子PCgSTL3、PCgZWF和PCgGPD,在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中控制木糖醇脱氢酶基因XYL2的表达水平,并研究其在NaCl诱导下对木糖醇脱氢酶活性及重组酿酒酵母木糖代谢流的影响.结果显示,以组成型强启动子PTPI为对照,添加0.4 mol/L NaCl作为渗透压诱导剂后,渗透压调控启动子控制下的木糖醇脱氢酶活性均得到增强,其中在PCgGPD控制下其活性变化最为明显,酶活提高了2.8倍.同时,以PCgGPD控制XYL2基因表达的重组菌木糖消耗量、乙醇产量和产率均为最高,与无诱导剂相比分别提高了62.3%、30.7%和9.7%,副产物木糖醇产率最低,下降了53.3%.本研究表明,渗透压调控启动子PCgGPD可显著提高木糖醇脱氢酶活性,通过添加NaCl作为渗透压诱导剂可实现对XYL2基因的可控表达,显著降低木糖醇积累,提高乙醇产率.
【作者单位】： 江南大学糖化学与生物技术教育部重点实验室;江南大学工业生物技术教育部重点实验室生物工程学院工业微生物研究中心;
【基金】：国家自然科学基金项目(31270080,31570052) 江苏省自然科学基金项目(BK20140138,BK20140134)资助~~
【分类号】：Q78
【正文快照】： CLC Q939.97木质纤维素类物质作为一种含量丰富的可再生资源,其利用受到广泛关注.利用木质纤维素发酵生产乙醇,能够有效缓解石油能源枯竭的压力.在木质纤维素的水解产物中除葡萄糖外,最重要的可利用资源是D-木糖[1],但是传统的酿酒酵母无法直接利用木糖,仅能利用其异构物木酮

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1 林燕清;谢志鹏;张建国;鲍文娜;潘海峰;李博义;;葡萄糖酸氧化杆菌木糖醇脱氢酶基因的克隆与表达(英文)[J];微生物学报;2012年06期

2 沈晓波;齐向辉;朱宏阳;徐虹;;Gluconobacter oxydans木糖醇脱氢酶基因的克隆表达及木糖醇的转化分析[J];中国生物工程杂志;2009年12期

3 陈宏文;苟元波;张卡;方柏山;;米曲霉木糖醇脱氢酶的分子模建与对接[J];微生物学报;2011年07期

4 ;环境保护上的应用[J];生物技术通报;1988年10期

5 汪天虹,高培基,王春卉,钟玲;瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因的分离与鉴定[J];生物工程学报;1998年03期

6 汪天虹,MerjaPentil　,李波;带有木糖还原酶基因和木糖醇脱氢酶基因的重组酿酒酵母的构建[J];菌物系统;1999年03期

7 杨_，

本文编号：1247731