克氏原螯虾泛素结合酶E2r基因的克隆及表达分析

发布时间：2017-12-03 08:15

  本文关键词：克氏原螯虾泛素结合酶E2r基因的克隆及表达分析

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【摘要】：为了解泛素结合酶E2r基因在克氏原螯虾性腺发育中的作用,利用RACE技术得到了c DNA全序列,命名为Pc-UBE2r。该基因序列全长为3 671 bp,包含泛素结合酶的特有结构域,以及半胱氨酸残基活化位点。开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸,预测蛋白分子量约为27.6 ku。BLAST比对发现,克氏原螯虾UBE2r基因与节肢动物UBE2r基因具有较高的同源性。系统进化分析表明,Pc-UBE2r基因与日本囊对虾聚为一枝。qRT-PCR研究表明,Pc-UBE2r基因在性腺中的表达量显著高于其他组织(P0.05)。在卵巢中,PcUBE2r基因的表达量在未发育期最低,在卵黄发生前期表达量快速增长,随后表达量逐渐降低。在精巢中,Pc-UBE2r基因的表达量在精母细胞发生期达到最高水平。组织原位杂交结果显示,Pc-UBE2r基因在卵巢中均匀分布在未发育期的卵母细胞细胞质中,随后逐渐迁移到卵母细胞细胞核以及滤泡细胞周围。在精巢中,Pc-UBE2r基因主要分布在精母细胞的周围。组织总蛋白Western blot检测发现,UBE2r蛋白在精巢和卵巢中的表达量也显著高于其他组织(P0.05)。综上所述,我们推测Pc-UBE2r基因在克氏原螯虾配子发生和性腺发育方面发挥了重要作用,本研究将为虾蟹类性腺发育调控的分子机制奠定基础和提供依据。
【作者单位】： 上海海洋大学省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室;江苏省淡水水产研究所;
【基金】：上海工程技术中心能力提升项目(13DZ2280500) 水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心项目(ZF1206)
【分类号】：S917.4
【正文快照】： 克氏原螯虾(Procambarus clarkii)又名小龙虾,原产于美国中南部以及墨西哥东北部[1],因其味道鲜美和营养丰富,已成为我国重要的水产养殖物种之一[2-3]。近年来,国内外克氏原螯虾的消费需求量快速增长[4-6],优质苗种的缺乏在一定程度上约束了克氏原螯虾养殖产业的发展。性腺发

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本文编号：1248008