莴苣过氧化物酶基因克隆及其在种子萌发中的功能研究

发布时间：2017-12-07 20:35

  本文关键词：莴苣过氧化物酶基因克隆及其在种子萌发中的功能研究

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【摘要】：随着ROS(O_2~?—、?OH、H_2O_2等)在细胞壁松弛中作用的确立,过氧化物酶(Peroxidase,POD)作为参与合成调节ROS的主要酶类一直被人们所热议。已报道的多篇文章都提出POD在种子萌发和胚根伸长中活性发生了变化,POD是否在种子萌发中起作用,起什么作用,与胚根伸长和胚乳弱化各有什么关系,都不是很清楚,所以本文主要针对POD在种子萌发中发挥的功能而作出研究。本文以莴苣(Lactuca sativa L.)种子为材料,用分光光度法检测在不同萌发介质中,胚根(Radical,RAD)和胚乳帽(Endosperm cap,CAP)中POD酶活性变化。在水中萌发时,RAD和CAP的POD酶活均表现出持续升高,且CAP中酶活明显高于RAD。在0.3%二氯异氰尿酸钠(Sodium dichloroisocyanurate,SDIC)溶液中萌发的种子,其完成萌发的起始时间点推迟,RAD中POD酶活性未变,CAP中酶活性显著下降。在水杨羟肟酸(Salicylhydroxamic acid,SHAM)的0.3 mM水溶液中萌发的种子,起始萌发时间点提前,CAP与RAD共同表现出POD酶活性的显著下降。用3,3',5,5'-四甲基联苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine,TMB)组织染色POD结果显示,POD存在于整个胚乳和胚根部位,各部分的染色深浅变化与分光光度计测得POD酶活性变化一致。通过搜索得到POD EST序列,用cDNA末端快速克隆(Rapid-amplification of cDNA ends,RACE)的技术扩增出该POD的完整cDNA,全长1259 bp,并命名为LsPOD1。利用实时定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术,检测三种萌发介质中不同吸胀时间的RAD和CAP中POD转录水平的表达。结果显示,在水中吸胀的种子中,CAP和RAD的LsPOD1表达量都随着吸胀时间的延长而升高。0.3%SDIC溶液抑制了CAP中LsPOD1的表达,对RAD没有影响。SHAM的加入上调了RAD和CAP中LsPOD1的表达。综合以上实验结果,得出这样一个结论:POD在种子萌发过程中,与细胞壁松弛有相关关系。
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q943.2

【参考文献】

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1 WANG Shu-ping;ZHANG Gai-sheng;SONG Qi-lu;ZHANG Ying-xin;LI Ying;GUO Jia-lin;CHEN Zheng;NIU Na;MA Shou-cai;WANG Jun-wei;;Programmed cell death, antioxidant response and oxidative stress in wheat f lag leaves induced by chemical hybridization agent SQ-1[J];Journal of Integrative Agriculture;2016年01期

2 张昂;郑瑜琬;陈腾;耿万刚;房玉林;王华;;葡萄休眠解除过程中冬芽组织活性氧与抗氧化系统的变化特征[J];西北植物学报;2012年10期

3 徐振江;陈兵先;赵晟楠;袁红霞;郜珊珊;张瑜;陈靖;王晓峰;;种子萌发过程中胚乳的突破性研究[J];植物生理学报;2012年09期

4 原向阳;郭平毅;张丽光;王鑫;赵锐;郭秀;宋喜娥;;干旱胁迫下草甘膦对抗草甘膦大豆幼苗保护酶活性及脂质过氧化作用的影响[J];中国农业科学;2010年04期

5 王启明;;干旱胁迫对大豆苗期叶片保护酶活性和膜脂过氧化作用的影响[J];农业环境科学学报;2006年04期

6 蒋明义;荆家海;;植物体内羟自由基的产生及其与脂质过氧化作用启动的关系[J];植物生理学通讯;1993年04期

7 刘时中;;自由基与衰老[J];生理科学进展;1983年02期

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本文编号：1263734