铁皮石斛赤霉素3-氧化酶基因的克隆及表达分析

发布时间：2017-12-08 00:06

  本文关键词：铁皮石斛赤霉素3-氧化酶基因的克隆及表达分析

  更多相关文章： 铁皮石斛 种子萌发 赤霉素-氧化酶 克隆 实时荧光定量PCR

【摘要】：目的克隆珍稀濒危药用植物铁皮石斛Dendrobium officinale赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidases,GA3ox)基因(Do GA3ox),并进行生物信息学和表达分析。方法采用RACE和RT-PCR技术获得Do GA3ox基因c DNA全长;利用生物信息学软件预测其编码蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 7.0和MEGA 6.0软件分别对其进行氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测基因表达模式。结果克隆到Do GA3ox基因(Gen Bank注册号KT597694),c DNA全长1 318 bp,编码一条由353个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为39 052.5,等电点6.21;Do GA3ox蛋白不含跨膜域和信号肽,具有GA3ox的保守结构域DIOX_N(40~130)和2OG-Fe II_Oxy(197~299);Do GA3ox与大葱、油棕、海枣、野茶树及蓝猪耳GA3ox蛋白一致性分别为55%、56%、54%、51%、50%,与单子叶植物大葱、油棕和海枣的亲缘关系较近。q RT-PCR实验结果显示Do GA3ox基因在铁皮石斛种子共生(非共生)萌发1~3级时,其相对表达量呈现出先升高后降低再升高的趋势,分别为未萌发种子的13.44(5.21)、7.28(2.32)和9.40(6.21)倍,由此可知,该基因在共生萌发种子中的表达量高于非共生萌发种子。结论首次克隆得到1个Do GA3ox基因的全长c DNA,其转录本在共生和非共生不同萌发级别种子中的表达特性说明该基因在铁皮石斛种子萌发中起着重要调控作用。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所;
【基金】：教育部博士点基金优先发展领域(20131106130002) 药植所创新团队发展计划(PIRTI-IT1302) 中央公益性科研院所基本科研业务费专项(YZ-12-14) 中医药行业科研专项(201407005)
【分类号】：S567.239
【正文快照】： 铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo为单子叶植物纲(Monocotyledoneae)兰科(Orchidaceae)石斛属Dendrobium Sw.多年生草本植物,作为中华九大仙草之首,具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳、明目强身等功效,是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的种[1-2]。和其他兰科植物

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 高剑平;张梁;孙莉娜;邱小明;;铁皮石斛组培快繁关键技术研究概述[J];福建农业科技;2010年04期

2 流沙;;种植铁皮石斛疑问解答[J];农村百事通;2011年19期

3 ;林下种石斛 生态又致富[J];林业与生态;2011年11期

4 席刚俊;赵桂华;;铁皮石斛栽培技术概况[J];安徽农业科学;2011年32期

5 泮玉华;王文霞;章乐建;;乐清栽培的铁皮石斛其有效部位化学成分的动态研究[J];海峡药学;2011年10期

6 ;黄金种植——铁皮石斛[J];农家之友;2012年01期

7 ;黄金种植——铁皮石斛[J];黑龙江农业科学;2012年03期

8 吴慧凤;宋希强;刘红霞;;铁皮石斛种子的室内共生萌发[J];生态学报;2012年08期

9 曾淑华;文国松;徐绍忠;查应红;杨生超;段承俐;;铁皮石斛磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆及表达分析[J];中草药;2012年04期

10 ;黄金种植——铁皮石斛[J];村委主任;2012年03期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 诸燕;斯金平;张爱莲;;人工栽培铁皮石斛多糖质量分数研究[A];第八届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2009年

2 陈立钻;倪云霞;孙继军;范华芬;许安玲;;铁皮石斛传统加工品与机械加工品的多糖含量对比研究[A];全国第六届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2004年

3 郭英英;刘京晶;斯金平;;雁荡山不同树种活树附生铁皮石斛多糖含量差异比较[A];生态文明建设中的植物学：现在与未来——中国植物学会第十五届会员代表大会暨八十周年学术年会论文集——第4分会场：资源植物学[C];2013年

4 王伯初;李标;;响应声波加载的铁皮石斛差异表达基因筛选及其功能初步研究[A];2008年全国生物流变学与生物力学学术会议论文摘要集[C];2008年

5 丁小余;侯北伟;谢明璐;;珍稀铁皮石斛基于微卫星标记的种质鉴别与保护遗传学研究[A];第九届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2010年

6 朱波;斯金平;苑鹤;;铁皮石斛杂交育种的初步研究[A];第九届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2010年

7 李宏博;张宏宇;朴钟云;;铁皮石斛组织培养研究[A];第九届全国药用植物及植物药学术研讨会论文集[C];2010年

8 斯金平;;铁皮石斛可持续发展关键技术研究进展[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年

9 金璐英;斯金平;张爱莲;魏涛;莫伊娜;;铁皮石斛中基本氨基酸含量变异规律[A];第十届全国药用植物及植物药学术研讨会论文摘要集[C];2011年

10 张治国;刘骅;夏志俊;王君晖;黄纯农;;铁皮石斛种子的超低温保存[A];中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编[C];2003年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 马盼盼;国家二级保护植物濒危中药材——铁皮石斛[N];中国现代企业报;2008年

2 周飞 段俊;铁皮石斛种植有了新技术[N];广东科技报;2010年

3 本报记者 蒋萍 郑蔚;“铁皮石斛”的近忧远虑[N];文汇报;2013年

4 元阳县沙拉托乡农服中心 杨梅;铁皮石斛组培快繁方法[N];云南科技报;2013年

5 谢云挺 俞平;我国成功栽培铁皮石斛[N];经济参考报;2003年

6 福娣;我国铁皮石斛栽培技术世界领先[N];上海科技报;2000年

7 记者 吕辉;云南研发铁皮石斛立体栽培技术成功[N];云南日报;2004年

8 叶胜荣;富阳铁皮石斛保护与栽培研究取得突破[N];中国中医药报;2003年

9 嵇哲;浙大育出6颗“金种子”[N];浙江日报;2006年

10 记者　施仁潮;铁皮石斛组培将实现工厂化生产[N];中国中医药报;2006年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 徐程;铁皮石斛种质资源与组培工厂化生产研究[D];浙江大学;2006年

2 严亮;中国传统兰科药用植物铁皮石斛基因组及其生物学特性研究[D];吉林大学;2014年

3 张泽锦;铁皮石斛的光合碳同化途径及其对环境变化的生理响应[D];中国农业大学;2014年

4 李标;声波刺激对铁皮石斛生长代谢的影响及其相关基因表达和克隆研究[D];重庆大学;2007年

5 滕建北;铁皮石斛与美花石斛茎尖生长机理及其多糖累积规律研究[D];成都中医药大学;2009年

6 关杰敏;铁皮石斛良种繁育与GAP种植关键技术研究[D];广州中医药大学;2014年

7 何铁光;铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究[D];广西大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 诸燕;铁皮石斛种质资源收集与评价[D];浙江农林大学;2010年

2 辛甜;组培铁皮石斛的品质评价研究[D];辽宁中医药大学;2011年

3 戴燕萍;铁皮石斛生产质量管理规范研究[D];浙江农林大学;2012年

4 王俊洁;铁皮石斛体细胞无性变异的生药学初步研究[D];云南中医学院;2012年

5 李东宾;冷胁迫下铁皮石斛抗寒基因的克隆与表达研究[D];浙江农林大学;2013年

6 郭洪波;铁皮石斛（Dendrobium candidum）组培快繁及其抗癌作用的研究[D];沈阳农业大学;2008年

7 李霖明;铁皮石斛菌根化育苗及重引入技术研究[D];海南大学;2011年

8 徐琳娜;茂兰喀斯特铁皮石斛环境适应性研究[D];贵州师范大学;2008年

9 朱波;铁皮石斛人工杂交技术与优良家系苗期选择[D];浙江农林大学;2011年

10 苑鹤;铁皮石斛主要活性成分遗传变异规律研究[D];浙江农林大学;2011年

，

本文编号：1264292