柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因的克隆及分析

发布时间：2017-12-10 01:15

  本文关键词：柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因的克隆及分析

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【摘要】：根据Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫核糖体蛋白S3a基因序列,利用计算机软件设计1对引物,从纯化的柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子中提取总RNA,然后应用RT-PCR技术扩增出约810 bp的产物,将其连入p MD18-T载体,经双酶切和PCR鉴定正确后,进一步进行DNA序列测定。将本研究测序结果与Gen Bank收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因进行比对,发现两序列间有6个碱基发生突变,其中3个为无义突变,其余为有义突变,同源性为97.9%;本研究扩增的S3a基因包含了一个全长795 bp的完整开放阅读框(ORF),编码264个氨基酸,蛋白分子量约为29.9 KD,ORF碱基同源性为99.0%,推导氨基酸序列同源性为98.1%。将本研究克隆的核糖体蛋白S3a基因与Gen Bank中收录的人和哺乳动物、植物、真菌、禽鸟等共15种真核生物的核糖体蛋白S3a基因进行比对发现,虽然本研究克隆和Gen Bank中收录的柔嫩艾美耳球虫S3a基因之间同源性最高,但是两者却与硕大利什曼原虫和布氏锥虫这2种原虫的S3a基因同源性较低,反而与禽鸟S3a基因的同源性较高。
【作者单位】： 南通出入境检验检疫局;江苏省疾病预防控制中心;南通大学实验动物中心;
【基金】：国家自然科学基金(编号:31301926) 江苏省自然科学基金(编号:BK20130388)
【分类号】：S852.7
【正文快照】： 鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)S3a基因是从E.tenella第1代裂殖体λZapⅡc DNA文库中筛选出来的1种核糖体蛋白(Et S3a)基因,由于它与具有调节细胞周期进程和参与蛋白合成的哺乳动物核糖体蛋白fte-1、植物核糖体蛋白cyc-07和酵母菌核糖体蛋白MFT1均具有较高的同源性,且其mR

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