中间锦鸡儿CiPP2C37-like基因的克隆与功能分析

发布时间：2017-12-13 12:16

  本文关键词：中间锦鸡儿CiPP2C37-like基因的克隆与功能分析

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【摘要】：植物在生长发育过程中,经常遭遇如干旱、高盐和低温等胁迫的影响,使植物生长发育受到抑制,严重时会导致植物死亡。植物必须通过调整自身的代谢功能来适应逆境。蛋白质磷酸化与去磷酸化是细胞生命过程的重要反应类型,也是蛋白质翻译后的主要修饰方式,生物通过这一系统调控其生命活动。PP2C是重要的蛋白磷酸酶,主要功能是通过参与不同的信号途径响应逆境胁迫。中间锦鸡儿(Caragana intermedia)在抗旱、耐寒、改善土壤养分、保护和恢复生态平衡等方面有着重要的作用。本研究从实验室前期构建好的柠条锦鸡儿SSH文库中获得一个PP2C37-lke基因的中间片段,通过同源克隆获得了中间锦鸡儿CiPP2C37-like基因,并进行了生物信息学、基因表达及相关功能的分析,主要结果如下：1.利用RACE技术扩增中间锦鸡儿CiPP2C37-like基因的5'和3'端序列,扩增长度分别为1158bp和505bp。该基因的cDNA全长为1734bp,5'UTR和3'UTR长分别为170bp和334bp,开放阅读框长为1230bp,编码含有409个氨基酸的亲水性蛋白。2.利用实时荧光定量PCR技术分析CiPP2C37-like基因的表达量。在100μMABA、300mMNaCl、脱水和4℃低温处理下该基因的表达量上调,说明CiPP2C37-like基因不同程度地受4种胁迫处理诱导。3.在10%、15%PEG6000、200mM NaCl和3μM ABA胁迫处理下检测CiPP2C37-like基因过表达转基因拟南芥的萌发率。结果显示CiPP2C37-like基因过表达拟南芥种子萌发率明显高于野生型。4.在200mM NaCl和干旱胁迫处理下CiPP2C37-like基因过表达转基因拟南芥幼苗对盐和干旱的耐受能力增强。5.正常生长条件下,CiPP2C37-like基因过表达转基因拟南芥在1.3周龄时幼苗比野生型小,4周龄之后与野生型大小基本一致。
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：Q943.2

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本文编号：1285118