地黄GGPPS1基因克隆及表达分析

发布时间：2017-12-23 03:25

  本文关键词：地黄GGPPS1基因克隆及表达分析　出处：《西北植物学报》2016年05期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：以地黄为材料,通过分析地黄转录组数据,设计特异性引物,克隆了地黄r{牛儿基r{牛儿基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)基因的cDNA序列,命名为RgGGPPS1,GenBank登录号为KU258808。同时在生物信息学分析的基础上,进行原核表达、纯化以及组织特异性表达分析。结果显示:(1)RgGGPPS1基因开放阅读框为987bp,编码328个氨基酸。(2)生物信息学分析结果显示,RgGGPPS1蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序(DDXXXXDD和DDXXD),与芝麻等双子叶植物中的GGPPS蛋白相似性较高。(3)利用构建的原核表达载体pET-32a-RgGGPPS1在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达RgGGPPS1重组蛋白,采用Ni 2+亲和层析得到了纯化的RgGGPPS1重组蛋白。(4)荧光定量PCR结果显示,RgGGPPS1基因在根中表达量最高,叶、茎中表达量较低。研究结果为进一步研究RgGGPPS1基因在地黄环烯醚萜苷生物合成途径中的功能奠定了基础。
【作者单位】： 河南中医学院药学院;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心;
【基金】：国家“十二五”科技支撑计划(2011BAI06B02) 河南中医学院博士科研基金(BSJJ2011-07,BSJJ2011-18) 第六届河南中医学院药学院大学生创新学习项目(YXCX[2015]3)
【分类号】：Q943.2;S567.234
【正文快照】： 地黄(Rehmannia glutinosa Libosch)是玄参科地黄属多年生草本植物,以其块根入药,是中国传统的常用中药材,广泛分布于河南、山西、山东和陕西等地,其中以河南古怀庆府地区(即温县、博爱、泌阳、孟县)为地黄的道地产区,该地区所产地黄称为“怀地黄”,是著名的“四大怀药”之一[

【参考文献】

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本文编号：1322241