葡萄花发育相关基因的克隆与表达特性研究

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葡萄花发育相关基因的克隆与表达特性研究

     论文目录

摘要第1-12页

ABSTRACT第12-16页

缩略词第16-19页

第一章 文献综述第19-40页

 1 开花决定第19-22页

   ·光周期诱导途径第19-21页

   ·春化作用途径第21页

   ·自主途径第21页

   ·赤霉素(GA)诱导途径第21页

   ·开花抑制基因第21-22页

 2 花的发端第22页

 3 花器官的发育第22-31页

   ·花发育的ABC模型及其发展第23-26页

     ·花发育的ABC模型第23页

     ·花发育的ABCD模型第23-24页

     ·花发育的ABCDE模型第24-25页

     ·花发育的四重奏模型第25-26页

   ·MADS-box基因研究进展第26-31页

     ·MADS-box基因的类型及其结构特点第26-27页

     ·MADS-box基因的重复及其功能的多样性第27-31页

       ·AP1/FRUITFULL(FUL)-like亚家族(A类)第28-29页

       ·AP3/PI-like(DEF/GLO)亚家族(B类)第29页

       ·AG-like 家族(C/D类)第29-30页

       ·SEP-like亚家族(E类)第30-31页

 4 葡萄花发育的分子生物学研究进展第31-38页

   ·葡萄的开花过程第31-32页

   ·卷须和花序是相关的结构第32-33页

   ·葡萄的花序起始和发育第33-35页

     ·葡萄的开花转变第33-34页

     ·赤霉素和基因VvGAI1对葡萄开花的影响第34页

     ·分生组织决定基因第34-35页

   ·葡萄的花和果实发育第35-38页

     ·花和果实的器官决定基因第35-36页

     ·葡萄的MADS-box基因第36-38页

       ·VvMADS1:一个推定的C类基因第36-37页

       ·VvMADS2和VvMADS4:推定的SEPALLATA基因第37页

       ·VvMADS3和VvMADS5:未知功能的MADS-box基因第37-38页

       ·VvMADS8:SOC1的同源基因第38页

       ·VvMADS9:一个B类MADS-box基因第38页

 5 小结与展望第38-40页

第二章 葡萄MADS-box家族基因保守片段的克隆与序列分析第40-48页

 1 材料与方法第41-43页

   ·试验材料第41页

   ·总RNA的提取及检测第41-42页

   ·cDNA第一链的合成第42页

   ·RT-PCR第42-43页

   ·序列及系统发育分析第43页

 2 结果与分析第43-47页

   ·总RNA提取第43-44页

   ·RT-PCR扩增葡萄MADS-box基因保守片段第44页

   ·序列及系统发育分析第44-47页

 3 讨论第47-48页

第三章 葡萄LEAFY基因启动子的克隆与序列分析第48-58页

 1 材料与方法第49-51页

   ·材料第49页

     ·植物材料第49页

     ·主要试剂第49页

   ·方法第49-51页

     ·总DNA提取第49页

     ·LFY基因克隆第49-50页

     ·LEAFY基因5′上游序列的克隆第50-51页

       ·接头、引物设计与合成第50页

       ·基因组步移文库的构建第50页

       ·PCR反应第50-51页

     ·启动子序列分析第51页

 2 结果与分析第51-56页

   ·LFY基因克隆与序列分析第51页

   ·LFY基因5′侧翼区域的克隆与序列分析第51-56页

     ·引物设计第51页

     ·基因组DNA的酶切、接头连接第51-52页

     ·Touch-Down PCR第52-53页

     ·序列分析及顺式元件预测第53-55页

     ·不同物种FLO/LFY同源基因启动子序列的比较第55-56页

 3 讨论第56-58页

第四章 葡萄AGAMOUS-like MADS-box基因的克隆与表达特性研究第58-72页

 1 材料和方法第59-64页

   ·试验材料第59-60页

   ·总RNA的提取第60页

   ·cDNA第一链的合成第60页

   ·3′RACE及VvAG编码区全长cDNA的扩增第60页

   ·VvAG序列多比对及系统发育树的构建第60-61页

   ·半定量RT-PCR检测VvAG在不同葡萄组织中的表达第61页

   ·VvAG基因结构分析第61页

   ·VvAG双元表达载体的构建及鉴定第61页

   ·农杆菌介导VvAG转化烟草第61-62页

   ·转VvAG基因烟草的分子检测第62-64页

     ·烟草总DNA的提取第62页

     ·烟草总RNA的提取第62-63页

     ·总RNA中DNA的消化第63页

     ·PCR及RT-PCR反应第63-64页

 2 结果与分析第64-71页

   ·VvAG基因的克隆第64页

   ·VvAG基因的序列分析第64-67页

   ·VvAG在不同葡萄组织中的表达分析第67-68页

   ·VvAG基因的基因组结构第68页

   ·VvAG双元表达载体的构建及鉴定第68-70页

   ·转VvAG基因烟草的PCR检测第70页

   ·转VvAG基因烟草的RT-PCR检测第70-71页

 3 讨论第71-72页

第五章 葡萄APETALA3(AP3)同源基因的克隆与表达特性研究第72-83页

 1 材料和方法第73-74页

   ·试验材料第73页

   ·总RNA的提取第73页

   ·cDNA第一链的合成第73页

   ·VvAP3 cDNA编码区全长的克隆与序列测定第73-74页

   ·VvAP3 cDNA序列对比及系统发育分析第74页

   ·VvAP3基因mRNA组织表达的RT-PCR分析第74页

   ·VvAP3基因组结构分析第74页

   ·VvAP3基因双元表达载体的构建及鉴定第74页

   ·VvAP3基因转化烟草及分子检测第74页

 2 结果与分析第74-82页

   ·VvAP3 cDNA全长的克隆与序列分析第74-76页

   ·VvAP3基因的系统发育分析第76-78页

   ·VvAP3基因在不同葡萄组织中的表达分析第78-79页

   ·VvAP3基因组结构分析第79页

   ·VvAP3双元表达载体的构建及鉴定第79-81页

   ·转VvAP3基因烟草的PCR检测第81页

   ·转VvAP3基因烟草的RT-PCR分析第81-82页

 3 讨论第82-83页

第六章 葡萄FLOWERING LOCUSC(FLC)类MADS-box基因的克隆与表达特性研究第83-93页

 1 材料和方法第84-85页

   ·试验材料第84页

   ·总RNA的提取第84页

   ·cDNA第一链的合成第84页

   ·VvFLC cDNA克隆与序列测定第84-85页

   ·VvFLC cDNA序列对比分析及系统发育树的构建第85页

   ·VvFLC基因mRNA组织表达的RT-PCR分析第85页

   ·VvFLC基因组结构分析第85页

   ·VvFLC基因双元表达载体的构建及鉴定第85页

   ·VvFLC基因转化烟草及分子检测第85页

 2 结果与分析第85-92页

   ·VvFLC cDNA全长的克隆与序列分析第85-87页

   ·VvFLC基因的系统发育分析第87-89页

   ·VvFLC基因在葡萄不同组织器官的表达分析第89页

   ·VvFLC基因组结构分析第89-90页

   ·VvFLC双元表达载体的构建及鉴定第90-91页

   ·转VvFLC基因烟草的PCR检测第91页

   ·转VvFLC基因烟草的RT-PCR检测第91-92页

 3 讨论第92-93页

第七章 葡萄FLOWERING LOCUST(FT)基因的克隆、表达及功能研究第93-107页

 1 材料和方法第95-96页

   ·试验材料第95页

   ·总RNA的提取第95页

   ·cDNA第一链的合成第95页

   ·VvFT cDNA克隆与序列测定第95页

   ·VvFT cDNA序列分析第95页

   ·VvFT基因mRNA组织表达的RT-PCR分析第95-96页

   ·VvFT基因组全长的克隆及基因结构分析第96页

   ·VvFT基因的二级及三级结构预测第96页

   ·VvFT基因正义表达载体的构建及鉴定第96页

   ·农杆菌介导VvFT转化烟草第96页

   ·转VvFT基因烟草的分子检测第96页

   ·转VvFT基因烟草的表型观察第96页

 2 结果与分析第96-105页

   ·葡萄FT基因编码区全长cDNA的克隆与序列分析第96-98页

   ·VvFT基因组全长的克隆及基因结构分析第98-99页

   ·VvFTmRNA在不同葡萄组织中的表达分析第99-100页

   ·VvFT的二级和三级结构预测第100-101页

   ·VvFT超表达载体的构建及鉴定第101-103页

   ·转VvFT基因烟草的PCR检测第103-104页

   ·转VvFT基因烟草的RT-PCR检测第104页

   ·转VvFT基因烟草表型观察第104-105页

 3 讨论第105-107页

全文讨论第107-112页

 1 葡萄中的MADS-box家族基因第107页

 2 葡萄中C/D类MADS-box基因的基因重复及表达模式第107-108页

 3 葡萄中B类基因的重复及表达模式的多样性第108-110页

 4 葡萄FLC亚家族基因的克隆及表达第110页

 5 VvFT基因的功能及其应用前景第110-111页

 6 葡萄LFY基因启动子序列特征及其在基因表达调控中的作用第111-112页

全文结论第112-114页

创新点第114-115页

参考文献第115-125页

附录第125-132页

攻读博士期间发表论文第132-133页

致谢第133页

论文编号BS1376267，这篇论文共133页
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