中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达及其发酵条件优化

发布时间：2018-01-03 23:10

  本文关键词：中温α-淀粉酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达及其发酵条件优化　出处：《食品与发酵工业》2016年04期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：以枯草芽孢杆菌为表达系统,以中温α-淀粉酶为目标蛋白,研究了启动子和信号肽对外源蛋白表达分泌的影响。分别选取了4种启动子以及8种信号肽来进行筛选,结果表明,启动子PApr E的强度最高,信号肽SPnpr E的分泌效率最好。针对重组菌株1A751Q31进行系统的发酵优化,在72 h发酵液中α-淀粉酶酶活达到380U/m L。在7.5 L发酵罐中进行放大实验,发酵液中α-淀粉酶酶活最高达到853 U/m L。以上研究表明,α-淀粉酶适合在枯草芽孢杆菌中进行表达,同时表明枯草芽孢杆菌是良好的异源蛋白表达系统。
[Abstract]:The effects of promoter and signal peptide on the secretion of exogenous protein were studied by using Bacillus subtilis as expression system . Four promoters and eight signal peptides were selected for screening . The results showed that the highest intensity of the promoter PApr E and the best secretion efficiency of signal peptide SPnpr E . The results showed that the activity of 伪 - amylase reached 380 U / mL in 72 h fermentation broth . The results showed that 伪 - amylase was suitable to be expressed in Bacillus subtilis . The results showed that Bacillus subtilis was a good heterologous protein expression system .

【作者单位】： 天津科技大学生物工程学院;中国科学院天津工业生物技术研究所;广西科学院非粮生物质酶解国家重点实验室国家非粮生物质能源工程技术研究中心;
【基金】：国家自然科学基金(No.31370089,21446008,31400079) 广西省科技支撑项目(14125008-2-22)
【分类号】：TQ925
【正文快照】： 芽孢杆菌属中的革兰氏阳性菌作为生产和分泌蛋白的微生物,在工业领域已经被广泛应用[1]。芽孢杆菌属作为工业微生物,拥有实用廉价的大规模生产系统,其目标蛋白分泌量在培养基中可以达到20~25 g/L。目前市场上可以购买到的酶制品大约有60%是由芽孢杆菌属生产的[2-3]。在芽孢杆

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本文编号：1375993