从基因、分子、细胞层面寻找创伤并发症的生物标志物及其临床意义探讨

发布时间：2018-01-24 03:14

本文关键词： 创伤脓毒症多器官功能障碍综合征基因多态性趋化因子生物标志物　出处：《第三军医大学》2017年博士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：2013年数据统计显示,每年因创伤就医的人次高达9.7亿,死于创伤的人数达480万。与此同时,创伤占全球疾病总负担的10%,是最为严重的全球性公共健康问题之一。近年来,随着急救技术的进步,在创伤早期因伤导致的直接死亡率已显著下降,但创伤后期并发症仍严重威胁患者的生存。脓毒症(sepsis)和多器官功能障碍综合征(MODS)是创伤后期较为常见的严重并发症。因此,如何有效地防治脓毒症和MODS等严重并发症,是提高创伤救治水平的关键。近年来,我们在危重病患者的救治和管理中取得了重大进展,但脓毒症的发病率和死亡率仍然居高不下。目前,脓毒症还没有特效的治疗方法。因此,早期预警、早期诊断是脓毒症救治的关键。生物标志物是指在不同生物学水平上特异性反映机体生理、病理或治疗过程中某种特征性变化的指标,是疾病早期预警诊断最常用的方法。目前已有多项关于脓毒症预警诊断标志物的研究,但均未获得令人满意的结果。脓毒症是一种涉及多器官、多系统的疾病综合征,发病机制极为复杂,单一标志物对脓毒症的诊断价值极其有限。因此,从基因、分子、细胞等多个层面系统地探寻创伤后脓毒症的敏感标志物,建立多种标志物联合的预警诊断模型,可能会提高对脓毒症的预警诊断效率。材料与方法通过Tagger软件,从CXC趋化因子基因家族中挑选出13个标签SNP位点。在3个独立的创伤人群中(1个筛选人群,2个验证人群,总共1700人),使用iMLDR方法对筛选出的SNP位点进行分型。计数在创伤人群中各标签SNP的基因型分布,并分析在显性遗传模式下、隐性遗传模式下各基因型与创伤后脓毒症的发生率及多器官功能障碍评分的关系。采集严重创伤患者伤后2小时内的外周血,使用脂多糖刺激后,分离血浆。并通过ELISA方法检测血浆中IFN-γ、IL-10、IL-8、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-4、LBP、HMGB1等9种细胞因子的表达水平。在创伤后1、3、5、7、14天,通过流式细胞术检测HLA-DR比例、CD64指数、CD4/CD8比值、NK细胞、Treg细胞比例;通过液相芯片技术检测38种细胞因子的表达水平。结果在筛选人群中,通过关联分析发现rs1429638、rs2297630位点与创伤后脓毒症发病率显著相关。在2个独立的验证人群中,rs1429638、rs2297630位点仍与创伤后脓毒症具有显著的相关性。在总人群中,rs1429638位点与创伤后脓毒症及多器官功能障碍评分存在显著的相关性;rs2297630位点与创伤后脓毒症存在显著的相关性。Rs2297630位点与脂多糖刺激后血浆中IL-6的表达水平相关,即携带rs2297630 A等位基因的患者IL-6表达水平更高。线性回归分析同样表明rs2297630位点与IL-6的相关性。在创伤早期,HLA-DR、CD64对创伤后脓毒症有一定的诊断价值,ROC曲线下面积最大分别为0.84与0.80。将HLA-DR、CD64、CD4/CD8联合后,可在脓毒症临床诊断前2天较好地预警脓毒症的发生,ROC曲线下面积可达到0.83。联合G-CSF、GM-CSF、IL-10、MDC、IL-15等5种细胞因子,能较好地诊断脓毒症。在创伤后第3、5、7天,诊断脓毒症的ROC曲线下面积均可达到1.00。结论本研究探索了CXC趋化因子家族基因多态性与创伤后并发症的关联意义。发现CXCL1基因中的rs1429638位点与创伤后脓毒症及多器官功能障碍评分存在显著的相关性;CXCL2基因中的rs2297630位点与创伤后脓毒症存在显著的相关性。这两个SNP位点可以作为创伤后脓毒症的基因标志物。HLA-DR、CD64、CD4/CD8可作为创伤后脓毒症预警诊断的标志物,将3种标志物联合后可提高对脓毒症的预警诊断效率。此外,多细胞因子的联合检测或许是一种非常有前景的脓毒症诊断方法。
[Abstract]:In recent years , we have made great progress in the treatment and management of sepsis , which is one of the most common methods for early warning and diagnosis of sepsis . Conclusion : The expression of rs2297630 in CXCL1 gene can be used as a marker of posttraumatic sepsis . It is suggested that the combination of HLA - DR , CD64 and CD4 / CD8 can be used as a marker for posttraumatic sepsis .

【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R641

【相似文献】