捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析

发布时间：2018-01-31 04:56

本文关键词： 捻转血矛线虫山羊 NADH 泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白外周血单个核细胞　出处：《畜牧兽医学报》2017年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：选取捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白(NDUDC)基因进行克隆表达,并对其功能进行研究。采用RT-PCR方法对NDUDC基因进行克隆,构建表达载体得到重组蛋白质,Western blot分析蛋白质的抗原特性;采血分离山羊外周血单个核细胞(PBMCs)与重组蛋白质共培养,利用间接免疫荧光试验检验重组蛋白质与细胞的结合情况;以不同质量浓度(0、10、20、40μg·mL-1)重组蛋白质刺激细胞,测定其对细胞增殖、细胞迁移和NO分泌的影响。结果表明,重组蛋白质能够有效刺激细胞增殖,显著提高细胞迁移能力以及增加NO的分泌。可见NDUDC蛋白具有较强的抗原性,可刺激细胞发挥免疫功能。
[Abstract]:Selection of Haemonchus NADH: quinone oxidoreductase domain containing protein (NDUDC) gene cloning and expression, and to study its function. RT-PCR method was used to clone the NDUDC gene expression vector was constructed by recombinant Western protein, blot protein antigen characteristics analysis; separation of goat peripheral blood mononuclear cells (blood PBMCs) co cultured with recombinant protein, using the combination of indirect immunofluorescence test of recombinant proteins and cells; with different concentrations (0,10,20,40 g mL-1) recombinant protein stimulated cells, determine its effects on cell proliferation, cell migration and secretion of NO. The results showed that the recombinant protein can effectively stimulate cell proliferation, significantly to improve the ability of cell migration and increase the secretion of NO. The visible NDUDC protein has strong antigenicity, can stimulate the cell immune function.

【作者单位】：南京农业大学动物医学院;
【基金】：国家重点基础发展研究计划(973计划)(2015CB150300) 江苏高校优势学科资助项目(PAPD)
【分类号】：S852.731
【正文快照】： 捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)隶属毛圆科(Trichostrongylidae)血矛属(Haemonchus),是牛、羊等反刍动物一种常见的胃肠道寄生性线虫,主要寄生于皱胃,偶见于小肠,以吸食宿主血液为生[1],可引起宿主皱胃黏膜的出血、损伤、发炎,影响宿主物质代谢,进而导致患畜贫血、腹泻、

【参考文献】