干扰CHD1L基因对肝内胆管细胞癌细胞系增殖和侵袭的影响

发布时间：2018-01-31 12:17

  本文关键词： CHDL RNAi 肝内胆管细胞癌 增殖 迁移 侵袭　出处：《肿瘤防治研究》2017年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨沉默CHD1L基因对肝内胆管细胞癌(ICC)细胞系增殖和侵袭的影响。方法采用Western blot和q RT-PCR法检测三种ICC细胞系(RBE、HCCC-9810、HUCCT1)中CHD1L蛋白和mRNA的表达;选择CHD1L高表达的ICC细胞系,将CHD1L-RNAi转染该细胞后,用Western blot法筛选出干扰效果最好的CHD1L-RNAi;应用CCK-8法、平板克隆集落形成实验、细胞划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测转染CHD1L-RNAi后细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果 CHD1L蛋白和mRNA水平在RBE细胞系中明显高于HCCC-9810和HUCCT1细胞系(P=0.003,P=0.012和P=0.008,P=0.015);CHD1L-RNAi1的干扰效果明显优于CHD1L-RNAi2和CHD1L-RNAi3(P=0.003,P=0.008);干扰CHD1L的表达,结果显示CHD1L-RNAi1组的增殖率、集落形成数、迁移率和穿膜的细胞数明显低于未处理组和阴性对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论干扰CHD1L基因能有效抑制RBE细胞系的增殖、迁移及侵袭能力。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of silencing CHD1L gene on intrahepatic cholangiocarcinoma. Methods Western blot and Q RT-PCR were used to detect the proliferation and invasion of three ICC cell lines. The expression of CHD1L protein and mRNA in HCCC-9810 HUCCT1; The ICC cell line with high expression of CHD1L was selected and CHD1L-RNAi was transfected into the cell line. Western blot method was used to screen out the best interference effect of CHD1L-RNAi. CCK-8 assay, plate clone colony formation assay, cell scratch assay and Transwell migration and invasion assay were used to detect the cell proliferation after transfection of CHD1L-RNAi. Results the levels of CHD1L protein and mRNA in RBE cell line were significantly higher than those in HCCC-9810 and HUCCT1 cell line P0. 003. P0. 012 and P0. 008, P0. 015; The interference effect of CHD1L-RNAi1 was significantly better than that of CHD1L-RNAi2 and CHD1L-RNAi3P0. 003P0. 008. Interfering with the expression of CHD1L, the results showed that the proliferation rate, colony formation number, migration rate and the number of cells transmembrane in CHD1L-RNAi1 group were significantly lower than those in untreated group and negative control group. Conclusion interfering CHD1L gene can effectively inhibit the proliferation, migration and invasion of RBE cell line.
【作者单位】： 南昌大学第二附属医院肝胆外科;南昌大学第二附属医院江西省分子医学重点实验室;
【基金】：江西省自然科学基金(20151BAB205010) 江西省卫计委科技厅项目(20161048) 南昌大学研究生创新基金项目(cx2015203)
【分类号】：R735.8
【正文快照】： 0引言染色质解旋酶DNA结合蛋白样-1样基因(chro-modomain helicase/ATPase DNA binding protein1-like gene,CHD1L)是在肝癌中新发现的致癌基因,它属于Sucrose nonfermenting2(SNF-2)类家族成员,具有高度保守的解旋酶功能,在维持染色质稳定、转录调控和DNA修复中起重要作用[1-

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