苹果果实β-半乳糖苷酶基因启动子的克隆与功能分析
本文关键词: 苹果 β-半乳糖苷酶 启动子 果实生长发育 出处:《西北植物学报》2017年01期 论文类型:期刊论文
【摘要】:根据已发表的苹果基因组序列设计特异引物,克隆得到苹果品种‘嘎拉’中β-半乳糖苷酶基因(Md-gal)的启动子。序列分析表明,该启动子除含有大多数高等植物启动子具有的保守元件外,还含有大量光响应元件和与激素相关的顺式作用元件,主要有赤霉素响应元件(GARE-motif和P-box)、茉莉酸甲酯(MeJA)应答元件(CGTCA-motif和TGACG-motif)和生长素响应元件(TGA-element);构建5个不同长度Md-gal启动子和GUS基因融合的瞬时表达载体,并进行苹果果实和烟草叶片转化试验,结果显示,5个启动子均具有启动子活性,在Md-gal启动子序列中激活与抑制调节元件并存,正调控元件位于-1206~-754bp区域,负调控元件位于-754~-597bp区域;对Md-gal启动子进行激素响应分析结果显示,激素处理可对其产生诱导作用,且MeJA处理后GUS活性最高。研究表明,Md-gal启动子具有真核基因启动子的基本结构特征和正负调控特性,可响应外源激素处理,可能在苹果果实生长发育和成熟软化方面具有一定的作用。
[Abstract]:The promoter of 尾 -galactosidase gene (Md-gal) in apple variety 'Gala' was cloned by designing specific primers according to the published genomic sequence of apple. The sequence analysis showed that the promoter of 尾 -galactosidase gene was obtained. In addition to the conservative elements of most higher plant promoters, the promoter also contains a large number of photoresponse elements and cis-acting elements associated with hormones. There are mainly gibberellin response elements GARE-motif and P-box). The response elements (CGTCA-motif and TGACG-motif) and auxin response elements (TGA-elemental) of methyl jasmonate (Meja); Five transient expression vectors with different length of Md-gal promoter and GUS gene fusion were constructed and transformed into apple fruit and tobacco leaves. The results showed that all five promoters had promoter activity. In the Md-gal promoter sequence, the active and inhibitory regulatory elements coexist. The positive regulator is located in the region of -1206 ~ (-754) BP, and the negative regulatory element is located in the region of -754 ~ (-597) BP. The results of hormone response analysis of Md-gal promoter showed that hormone treatment could induce it, and the activity of GUS was the highest after MeJA treatment. Md-gal promoter has the basic structure characteristics and positive and negative regulatory characteristics of eukaryotic gene promoter, which can respond to exogenous hormone treatment, and may play a role in apple fruit growth, development and ripening and softening.
【作者单位】: 西北农林科技大学园艺学院;陕西省苹果工程技术研究中心;
【基金】:现代农业产业技术体系建设专项(CARS-28) “十二五”农村领域国家科技计划(2013BAD02B01-2) 西北农林科技大学专项资金(2013BSJJ113,2014YB086)
【分类号】:S661.1;Q943.2
【正文快照】: 果肉质地是决定苹果果实内在品质的重要指标,也是影响果实商品性和消费者偏好的重要因素。植物细胞壁使果实具有一定的形状和弹性,其结构和成分的改变是引起果实质地变化的主要原因[1-2]。研究表明,在果实成熟过程中,细胞膨压发生改变,细胞壁酶作用于初生壁和胞间层,使得细胞
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,本文编号:1480012
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