陆地棉基因GhWRKY40-1的克隆及表达分析
本文关键词： 棉花 WRKY 转录因子 基因克隆 序列分析 出处：《棉花学报》2017年02期 论文类型：期刊论文
【摘要】：【目的】WRKY转录因子通过激活下游一系列抗逆应答基因的表达而提高植株的综合抗性。本研究旨在研究WRKY转录因子在陆地棉中的功能。【方法】通过基因芯片筛选鉴定出1个逆境诱导的陆地棉WRKY转录因子基因,由于此基因编码蛋白含有1个典型的WRKY结构域,且与拟南芥At WRKY40具有较高相似性,故命名为GhWRKY40-1。采用电子克隆及反转录-聚合酶链反应技术获得GhWRKY40-1基因c DNA全长,并对其进行序列分析及结构与功能预测。【结果】GhWRKY40-1的开放阅读框为981 bp,编码326个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为35.78×103,等电点为8.39。GhWRKY40-1在拟南芥原生质体中瞬时表达定位于细胞核,且具有转录激活活性。RT-PCR结果表明,GhWRKY40-1受甘露醇诱导上调表达。【结论】推测GhWYKY40-1可能参与干旱胁迫应答反应,并且在植物逆境胁迫中发挥重要作用。上述分析为进一步从分子水平上验证其抗逆生物学功能以及揭示棉花非生物胁迫抗逆机制奠定了基础。
[Abstract]:[objective] WRKY transcription factors enhance the comprehensive resistance of plants by activating downstream expression of a series of stress responsive genes. The purpose of this study was to study the function of WRKY transcription factors in Upland Cotton (Gossypium gossypium L.). A WRKY transcription factor gene induced by stress was identified by over-gene chip screening in Upland cotton (Gossypium hirsutum L.). Because this gene encoding protein contains a typical WRKY domain, and has a high similarity with Arabidopsis at WRKY40. Therefore, it was named GhWRKY40-1.The full length of c DNA of GhWRKY40-1 gene was obtained by electronic cloning and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Sequence analysis and structural and functional prediction were performed. [results] the open reading frame of GhWRKY40-1 was 981bp, encoding 326 amino acids. The relative molecular weight of predicted protein was 35.78 脳 10 ~ (3) and the isoelectric point was 8.39. GhWRKY40-1 was located in the nucleus of Arabidopsis thaliana protoplast. And the transcriptional activation activity. RT-PCR results showed that. The expression of GhWRKY40-1 was up-regulated by mannitol. [conclusion] GhWYKY40-1 may be involved in drought stress response. The above analysis laid a foundation for further verification of its biological function at molecular level and for revealing the mechanism of cotton abiotic stress resistance.
【作者单位】： 新疆农垦科学院棉花研究所/农业部西北内陆区棉花生物学与遗传育种重点实验室/新疆兵团棉花遗传改良与高产栽培重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31260360) 兵团青年科技创新资金专项(2011CB001)
【分类号】：S562
【正文快照】： WRKY转录因子是1类锌指型转录因子,成员均含有1~2个大约60个氨基酸残基所组成的保守的WRKY结构域,且含有7个绝对保守的氨基酸残基WRKYGQK,并由此得名为WRKY。WRKY转录因子广泛参与植物的逆境应答,在拟南芥、小麦、大豆和水稻中已有大量的文献报道WRKY转录因子受环境因子(如高
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，本文编号：1482049
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