碳酸盐碱度对瓦氏雅罗鱼氨氮排泄及Rh基因表达的影响

发布时间：2018-02-14 06:21

  本文关键词： 瓦氏雅罗鱼 碳酸盐碱度 耗氧率 排氨率 血氨含量 Rh基因 氧氮比 免疫组化　出处：《上海海洋大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii,以下简称雅罗鱼)隶属鲤形目(Cypriniformes)鲤科(Cyprinidae)雅罗鱼亚科(Leuciscus),俗称东北雅罗鱼、华子鱼、白鱼,是我国北方知名的土著鱼类,也是东北人民喜食的“三花五罗”之一[1]。雅罗鱼主要分布在我国黑龙江流域、辽河及内蒙古一些内陆盐碱湖泊中,在黄河流域沿岸的周边省区(河南、山西、陕西、甘肃和青海等)也有分布。瓦氏雅罗鱼具有极强的耐受碳酸盐碱度(Carbonate alkalinity,CA)特性,能够在内陆高盐碱湖泊达里湖(CA53.57,pH 9.6)中生存。这些天然优势使其成为开展鱼类盐碱适应性进化及耐盐碱分子生理机制研究理想的实验材料。1、本研究所用实验鱼为人工繁育获得的F3,通过采用封闭流水式呼吸室法对6个碳酸盐碱度梯度(分别为CA10、30、50、70、90、110 mmol·L-1)和1个淡水对照组(CA0.44 mmol·L-1)的瓦氏雅罗鱼做碱耐受实验,结果发现,随着碱度的升高,瓦氏雅罗鱼的耗氧率和排氨率均为先下降后上升,且都显著低于对照组(P0.05)。在CA90时,耗氧率和排氨率均达到最低值,表明CA90可能是达里湖瓦氏雅罗鱼所能承受的最大碱度胁迫。相反地,随着碱度的升高,瓦氏雅罗鱼的血氨含量呈现先上升后下降的趋势,在CA90时达到峰值。然而在CA0-50时,瓦氏雅罗鱼血氨含量无显著差异(P0.05),表明达里湖瓦氏雅罗鱼进化出特殊的排氨机制,使其体内能够保持较低的氨氮含量以此规避氨中毒。定量PCR显示,参与氨转运的4种Rh基因在不同碱度处理组均有不同程度的上调表达;其中Rhcg1和Rhcg2在高碱度CA110最为显著(P0.05),表明Rhcg1和Rhcg2可能在达里湖瓦氏雅罗鱼高碱胁迫下的排氨过程中发挥重要作用。能量代谢研究(O:N)发现,在CA0-70时,雅罗鱼无需消耗过多能源物质即可实现高碱度胁迫下的能量需求;而在碱度为CA90-110时,则主要消耗脂肪和碳水化合物供能,减少蛋白质耗能,以此降低毒氨的产生。依据上述研究结果,本文深入探讨了达里湖瓦氏雅罗鱼在高碱胁迫下的排氨策略及其可能的生理和分子机制,为推动达里湖瓦氏雅罗鱼在不同类型盐碱水域的增养殖提供科学依据。2、本实验选用15尾达里湖瓦氏雅罗鱼人工繁育F3,采用静水密闭的方法,旨在通过对雅罗鱼在高碱度(NaHCO3 50 mmol/L)和高氨(NH4CO3 1.5 mmol/L)胁迫下处理4个时间点(2 h、4 h、6 h和8 h)耗氧率和排氨率变化的研究,初步了解达里湖雅罗鱼对不同环境胁迫的适应能力。耗氧率实验结果表明:与淡水组相比,高碱度和高氨显著抑制了雅罗鱼的耗氧率(P0.05);高碱度组与高氨组相比,雅罗鱼耗氧率除了在监测的第1个时间点内存在显著性差异外(P0.05),其它时间点无明显差异(P0.05)。排氨率实验结果显示:与淡水组相比,高碱度和高氨均显著抑制了雅罗鱼的排氨率(P0.05)。其中高氨组排氨率在所监测的4个时间点内全部下降,并与淡水组和高碱度组相比存在极显著差异(P0.01)。本研究通过比较达里湖雅罗鱼在淡水、高碳酸盐碱度(模拟自然水体)和高氨胁迫下的耗氧率、排氨率的变化,初步了解达里湖雅罗鱼对不同环境胁迫的适应能力,为该物种在内陆三北地区的养殖开发提供基础资料。3、本实验以碱度为50mmol/L胁迫下瓦氏雅罗鱼作为处理组,淡水作为对照组。通过免疫组化技术,对Rhcg1蛋白在雅罗鱼鳃组织中的定位和表达情况。结果表明,与对照组相比,碱度组雅罗鱼鳃组织鳃小片周围荧光强度高,这说明高碱度可能促使Rhcg1基因高表达。
[Abstract]:The Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) Cyprinidae ( Cyprinidae ) is a famous indigenous fish in the north of China . The results showed that , with the increase of alkalinity , the oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of Yarrowfish were higher than those in the control group ( P0.05 ) . The experimental results showed that the high alkalinity and high ammonia significantly inhibited the oxygen consumption rate ( P0.05 ) . Compared with the fresh water group , the high alkalinity and the high ammonia significantly inhibited the oxygen consumption rate ( P0.05 ) . Compared with the fresh water group , the high alkalinity and the high ammonia significantly inhibited the ammonia excretion rate ( P0.05 ) . Compared with the control group , the high alkalinity and the high ammonia had significantly different fluorescence intensity around the branchial gill of the fish branchial gill , which suggested that the high alkalinity could promote the high expression of Rhcg1 gene .

【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4

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本文编号：1510073