藤茶香树脂醇合成酶基因编码区克隆及表达分析

发布时间：2018-02-21 00:41

  本文关键词： 中草药 藤茶 香树脂醇合成酶 亚细胞定位 Southern印迹 荧光定量　出处：《西北植物学报》2017年03期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为研究藤茶(Ampelopsis grossedentata)三萜类化合物的生物合成,采用RT-PCR方法,从藤茶叶片cDNA中扩增得到香树脂醇合成酶(amyrin synthase)基因,命名为AgAS。该基因编码区长2 250bp,编码750个氨基酸,与葡萄的同源蛋白亲缘关系最近。亚细胞定位和Southern blot结果表明,AgAS编码蛋白主要定位于细胞核与细胞膜,在藤茶基因组中存在2个拷贝。实时荧光定量PCR结果显示,AgAS基因在紫芽藤茶的根、茎和叶均有表达,其中叶片中表达最高,茎次之,根中表达量最少,且随着叶片成熟程度的增加,表达量呈先升后降趋势;而在绿芽藤茶中,AgAS基因在叶片中的表达量随着成熟程度的增加呈上升趋势,根与茎中表达量相对较少。
[Abstract]:In order to study the biosynthesis of triterpenoids from Ampelopsis grossedentata, the amyrin synthase gene was amplified from the cDNA of tea leaves by RT-PCR method. The gene was named AgAS. the coding region of the gene was 2250bpand encoding 750 amino acids. The results of subcellular localization and Southern blot showed that the protein encoded by Agnas was mainly located in the nucleus and cell membrane. The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that Agnas gene was expressed in the roots, stems and leaves of Violet tea, in which the highest expression was found in leaves, the second in stems, and the least in roots. With the increase of leaf maturation, the expression level of AgAS increased first and then decreased, while the expression of AgAS in leaves increased with the increase of maturity, and the expression of AgAS in root and stem was relatively small.
【作者单位】： 福建农林大学生命科学学院;福建农林大学作物科学学院;
【基金】：国家科技支撑计划(2013BAD01B05)
【分类号】：Q943.2;S567.19

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本文编号：1520500