实时荧光定量PCR技术在转基因食品检测中的应用研究进展
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第2 8卷第 1期 2 0 1 3年1月
内蒙古民族大学学报(自然科学版 ) J o u r n a l o f I n n e r Mo n g o l i a Un i v e r s i t y f o r Na t i o n li a t i e s
Vo I . 2 8 N o . 1
J a n . 2 0 1 3
实时荧光定量 P CR技术在转基因食品检测中的应用研究进展 倪娜,,张智勇L ,李国瑞,夏春丽,李华,郭闯 ( 1内蒙古民族大学生命科学学院,内蒙古通辽 0 2 8 0 4 3; 2 .通辽市农业科学研究院,内蒙古通辽 0 2 8 0 1 5 )
[摘要]随着转基因食品的快速发展,转基因食品的大规模商业化引起了对安全性问题的广泛争议 .为了对转 基因食品作出综合的评价,建立灵敏、快速、准确、高通量的检测方法十分必要.本文综述了实时荧光定量 P C R 技术的基本原理、优缺点及其在转基因食品检测中的应用与研究进展,并探讨了该技术存在的问题和应用前 景.
【关键词]转基因食品;实时荧光定量 P C R;检测方法[中图分类号] T S 2 [文献标识码] A [文章编号] 1 6 7 1— 0 1 8 5 ( 2 0 1 3 ) 0 1— 0 0 6 4— 0 7
De v e l o p me n t o f R e a l - T i me F l u o r e s c e n t Qu a n t i t a t i v e PCR i n Ge n e t i c a l l y Mo d i ie f d Fo o d De t e c t i o n NI Na , Z HANG Z h i - y o n g, L I Gu o— ni r , XI A C h u n - l i , L I Hu a , GUO C h u ng a
( 1 . C o l l e g e o f L i f e S c i e n c e s, I n n e r Mo n g o l i a U n i v e r s i t y f o r t h e N a t i o n a l i t i e s, T o n g l i a o 0 2 8 0 4 3, C h i n a; 2 . T o n g l i a o A c a d e m y o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s, T o n g l i a o 0 2 8 0 1 5, C h i n a )
Ab s t r a c t: Wi t h t h e r a p i d d e v e
l o p me n t o f g e n e t i c a l l y m o d i i f e d f o o d s ( G MF ), a c o n s i d e r a b l e c o n t r o v e r s y w a s d i s p u t e d o v e r t h e s a f e t y p r o b l e m o f GMF b e c a u s e o f i t s l a r g e s c le a c o mme r c i li a z a t i o n . T o e v lu a a t e t h e s fe a t y o f GMF s y n he t t i c a l— l y, a s e n s i t i v e,r a p i d, a c c u r a t e, h i g h - hr t o u g h p u t q u a n t i t a t i v e a s s a y wa s n e c e s s a r y . I n t h i s p a p e r, r e s e a r c h p r o g r e s s o f
t h e f u n d a me n t ls a, a d v a n t a g e s a n d d i s a d v nt a a g e s o f r e a l— t i me l f u o r e s c e n t q u nt a i t a t i v e P C R a p p l i e d t o GMF d e t e c t i o n i f e l d wa s r e v i e we d . Al s o, he t e x i s t i n g p r o b l e ms a n d p r a c t i c l a p r o s p e c t o f t h i s t e c h n o l o g y we r e e x p l o r e d . Ke y wo r d s: Ge n e t i c ll a y mo d i i f e d f o o d; Re a l— t i me q u nt a i t a t i v e P CR; De t e c t i o n me ho t d
1 引言 2 0世纪7 0年代以来,应用于食品资源改造的转基因技术发展十分迅速.人们使用基因工程技术,将优良的外源基因转
入到生物体内,通过改造其遗传物质使其性状、营养品质等向人们所需要的目标转变,得到所谓的转基因生物;来源于转 基因生物及其衍生产品的食品即为转基因食品 ( G e n e t i c l a l y Mo d i i f e d F o o d, G MF ) .
截至 2 0 1 1年,全球
转基因作物的种植面积已由1 9 9 6年的 1 7 0万公顷增长至 1 . 6亿公顷,这个增长速度在现代农业史上是前所未有的… .转基因技术的快速发展一方面展现了先进科技对生产力的巨大推动作用,另一方面也引发了关于转基因 食品安全性问题的争论 . 为了能够有效地评价转基因食品的安全性,对转基因食品进行标识管理,并且建立灵敏、快速、准确的方法对其含有
的转基因成分进行检测,成为了当前研究的热点问题 .目前,转基因食品的检测方法主要有两类:一类是对外源基因的表达产物进行检测,如酶联免疫法 ( E uS A )、蛋白质印迹法 ( We s t e r n b l o t )、试纸条法 ( L a t e r lF a l o wS t r i p )等;另一类是直接对外源基因序列的检测,主要是以核酸为基础的聚合酶链式反应技术法 ( P o l y m e r s a e C h a i n R e a c t i o n, P C R ) . 近年来,结合了P C R和杂交探针两者优点的实时荧光定量 P C R技术 ( R e a l— t i meQ u nt a i t a t i v eP o l y me r a s e C h a i nR e a c - t i o n, R Q— P C R )发展十分迅速.通过实时分析 P C R过程中荧光信号的变化,便能获得样品中 D N A模板含量的定量结果,其
作者简介:倪娜,内蒙古民族大学生命科学学院助教
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