犬细小病毒SH14株VP2基因原核表达及免疫原性分析

发布时间：2018-03-06 20:07

  本文选题：犬细小病毒　切入点：VP基因　出处：《中国动物传染病学报》2016年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：根据犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)SH14株基因序列设计引物,采用PCR方法扩增CPV VP2基因,经Bam HⅠ、XhoⅠ双酶切后,将其克隆至p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-VP2,经酶切鉴定和测序验证正确后转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,应用SDS-PAGE法检测蛋白的表达。然后,使用纯化的重组VP2蛋白制备其兔源多克隆抗体,分别应用蛋白免疫印迹、间接免疫荧光检测该抗体的免疫原性。结果表明,p GEX-4T-VP2能在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达,所制备的兔抗CPV-VP2抗体能与重组蛋白和病毒蛋白发生特异性反应。本研究为研发CPV亚单位疫苗、检测技术及致病机理研究等奠定了物质基础。
[Abstract]:According to the gene sequence of Canine Parvovirus-CPV SH14 strain, the CPV VP2 gene was amplified by PCR method. The gene was digested by Bam H 鈪，

本文编号：1576287