注射dsRNA对飞蝗Knickkopf基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率

发布时间：2018-03-07 19:21

  本文选题：飞蝗　切入点：基因沉默　出处：《昆虫学报》2016年12期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：【目的】本研究旨在评估dsRNA对飞蝗Locusta migratoria Knickkopf(Knk)基因mRNA和蛋白表达的沉默效率,以期为基于RNAi技术探索飞蝗体内基因功能的研究提供基础资料。【方法】选择飞蝗2龄第1天的若虫,将体外合成的飞蝗Knk基因dsRNA注射进入飞蝗体腔内,注射后48,72和96 h分别解剖试虫的腹部表皮,一半用于RT-q PCR方法检测其mRNA表达;另一半用于Western blot法检测其蛋白的表达量。【结果】dsRNA注射进入飞蝗体腔内48,72和96 h后,与对照相比,Knk mRNA水平相对表达量分别降低78.3%,96.2%和95.1%;Knk蛋白表达量分别降低61.2%,33.3%和52.9%。【结论】注射ds Knk能显著沉默飞蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表达,但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。
[Abstract]:[objective] to evaluate the silencing effect of dsRNA on the expression of mRNA and protein in Locusta migratoria KnickkopfKnkknkkknkkkknkknkknkkkknkkkkknkknkkkkknkkkknkknkkkknkknkkkknkkkknkkkkkkkknkkkkk@@. The Knk gene dsRNA was injected into the body cavity of locust migratoria migratoria in vitro. The abdominal epidermis of the tested insect was dissected at 4872 h and 96 h after injection, half of which was used to detect the expression of mRNA by RT-q PCR method. The other half was used to detect the protein expression by Western blot method. [results] dsRNA was injected into the body cavity of Locusta migratoria for 4872 h and 96 h. Compared with the control group, the relative expression of Knk mRNA decreased by 78.2% and 95.1%, respectively. The expression of Knk protein decreased by 61.2% and 52.9%, respectively. [conclusion] the expression of Knk gene mRNA and protein was significantly silenced by injection of DS Knk. But the silencing efficiency of mRNA level was higher than that of protein level.
【作者单位】： 山西大学应用生物学研究所;山西大学生命科学学院;中国科学院动物研究所;
【基金】：国家自然科学基金项目(31272380,31672364) 山西省科技基础条件平台项目(2015091010)
【分类号】：Q963

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本文编号：1580644