共同沉默DcR3和EGFR基因对结肠癌细胞株SW480体外生长的影响

发布时间：2018-03-07 21:46

  本文选题：受体　切入点：肿瘤坏死因子　出处：《福建医科大学学报》2017年01期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：目的探讨共同沉默诱骗受体3(DcR3)和表皮生长因子(EGFR)基因对结肠癌细胞株SW480生长增殖的影响和诱导凋亡作用研究。方法根据DcR3、EGFR的cDNA序列构建3组针对DcR3和EGFR的siRNA,分别使用脂质体Lipofectamine 2000转染的方法将各个siRNA导入结肠癌细胞株SW480中,48h后通过实时荧光定量PCR检测各个siRNA对肿瘤靶基因mRNA表达的影响,采用Western-blot技术检测其靶基因蛋白的表达水平,筛选出对人结肠癌SW480细胞系中DcR3和EGFR抑制效果最强的siRNA,然后单独或联合转染SW480细胞,MTT法检测转染后对结肠癌细胞株SW480生长增殖活性的影响,流式细胞仪检测对结肠癌细胞株SW480的诱导凋亡作用。结果共同沉默DcR3和EGFR基因对SW480细胞增殖的抑制作用优于DcR3或EGFR单基因沉默组(P0.05)。双基因共沉默组、DcR3单基因沉默组、EGFR单基因沉默组转染48h后转染细胞的凋亡率分别为(20.1±1.7)%,(16.5±2.2)%及(15.9±1.3)%,差别具有统计学意义(P0.05)。结论DcR3和EGFR双基因共沉默能有效抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖并诱导其凋亡,且作用优于DcR3或EGFR单基因沉默。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of co-silencing decoy receptor 3DcR3) and epidermal growth factor (EGFR3) gene on the proliferation and apoptosis of colon cancer cell line SW480. Methods according to the cDNA sequence of DcR3EGFR, three groups of siRNAs targeting DcR3 and EGFR were constructed, respectively. Lipofectamine Lipofectamine 2000 was used to transfect siRNA into colon cancer cell line SW480 for 48 h. The effect of siRNA on mRNA expression of tumor target gene was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. The expression level of target gene protein was detected by Western-blot. The siRNAs which had the strongest inhibitory effect on DcR3 and EGFR in human colon cancer SW480 cell line were screened out, and then transfected with SW480 cells alone or in combination to detect the effect of transfection on the growth and proliferation of SW480 cell line. Results the inhibitory effect of co-silencing DcR3 and EGFR genes on the proliferation of SW480 cells was better than that of DcR3 or EGFR single gene silencing group (P 0.05). The apoptosis rates of the transfected cells were 20.1 卤1.7% and 15.9 卤1.3%, respectively, in the single gene silencing group after 48 h transfection. Conclusion the co-silencing of DcR3 and EGFR gene can effectively inhibit the proliferation and induce apoptosis of human colon cancer cell line SW480. And the effect is better than that of DcR3 or EGFR single gene silencing.
【作者单位】： 福建医科大学附属第一医院胃肠外科二区;
【基金】：福建省教育厅科技项目(JA10146) 福建省科技计划重点项目(2014y0021)
【分类号】：R735.35

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本文编号：1581089