梅花鹿胸腺素β4基因真核表达载体的构建及鉴定

发布时间：2018-03-12 06:37

  本文选题：梅花鹿　切入点：胸腺素β　出处：《畜牧与兽医》2017年08期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：为了构建梅花鹿胸腺素β4(Tβ4)基因真核表达载体,使用TRIzol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,RT-PCR方法特异性扩增梅花鹿Tβ4基因,目的基因插入真核表达载体VR1012构建表达质粒,将质粒瞬时转染到293T人胚肾细胞系,使用Western blot和免疫荧光方法检测目的基因的表达。结果显示:克隆得到的梅花鹿Tβ4基因长度为135 bp,编码44个氨基酸,成功构建真核表达载体VR1012-Tβ4-HA,转染后梅花鹿Tβ4在293T细胞中表达,而且主要表达在细胞浆中。本试验为进一步研究Tβ4在鹿茸生长中的作用奠定了基础。
[Abstract]:In order to construct the eukaryotic expression vector of sika deer thymosin 尾 4N T 尾 4) gene, the T 尾 4 gene of sika deer was specifically amplified by TRIzol. The target gene was inserted into eukaryotic expression vector VR1012 to construct the expression plasmid. The plasmid was transiently transfected into 293T human embryonic kidney cell line. The expression of the target gene was detected by Western blot and immunofluorescence. The results showed that the length of T 尾 4 gene of sika deer was 135bp, encoding 44 amino acids. The eukaryotic expression vector VR1012-T 尾 4-HAwas successfully constructed. After transfection, T 尾 4 was expressed in 293T cells and mainly in the cytoplasm, which laid a foundation for further study on the role of T 尾 4 in the growth of velvet antler.
【作者单位】： 长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心;
【基金】：吉林省科技发展计划(20140622003JC)
【分类号】：S825

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本文编号：1600370