牛结蛋白基因启动子的初步改造研究
本文选题：牛 切入点：结蛋白 出处：《畜牧兽医学报》2016年12期 论文类型：期刊论文
【摘要】：本研究在前期研究工作的基础上,通过添加特异的调控元件对牛结蛋白(Desimn)基因启动子进行改造,以期获得活性较高且具有肌肉组织特异性的启动子。本研究以300bp的牛结蛋白基因启动子为基础,对其进行改造,即通过串联多拷贝的正调控元件的方式,成功构建了3个改造后的结蛋白基因启动子片段:pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300。结果表明,pGL3-desmin300-desmin180、pGL3-MD-αD1-desmin300和pGL3-αD2-αD1-desmin300的启动子活性分别是野生型启动子pGL3-desmin300的1.67、2.56和2.88倍,说明改造后的启动子片段具有较高的启动活性。同时,牛骨胳肌卫星细胞和成纤维细胞试验结果表明,以上3组改造后的启动子片段具有较强的肌肉特异性,以上高效肌肉特异性启动子片段的应用为提高肌肉产量的转基因家畜肉的生产提供重要帮助。
[Abstract]:On the basis of previous research work, the promoter of bovine desmin gene was modified by adding specific regulatory elements. The aim of this study was to obtain a highly active and muscle-specific promoter. Based on the 300bp bovine desmin gene promoter, the promoter was modified by a series of multiple copies of positive regulatory elements. Three modified promoter fragments of desmin gene: pGL3-desmin300-desmin180, pGL3-MD- 伪 D1-desmin300 and pGL3- 伪 D2- 伪 D1-desmin300 were successfully constructed. The results showed that the promoter activity of pGL3-desmin300 and pGL3- 伪 D2- 伪 D1-desmin300 was 1.67 / 2.56 and 2.88 times of that of wild type promoter pGL3-desmin300, respectively. The experimental results of bovine skeletal muscle satellite cells and fibroblasts showed that the above three groups of modified promoter fragments had strong muscle specificity. The application of these highly efficient muscle specific promoter fragments provides important help for the production of transgenic domestic meat with increased muscle yield.
【作者单位】： 东北农业大学生命科学学院;
【基金】：基金项目:高产优质转基因肉牛新品种培育(2014ZX08007-002)
【分类号】：S823
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，本文编号：1617023
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