非粮生物质能源与高技术产业化研讨会论文集》2010年

发布时间：2016-11-02 09:00

  本文关键词：转录因子在植物抗病基因工程中的研究进展，由笔耕文化传播整理发布。

《第十二届中国科协年会——非粮生物质能源与高技术产业化研讨会论文集》2010年

黄连木LEC1转录因子基因的克隆及表达分析

林善枝  张志翔  侯路  王涛  侯琦  孙润泽  

【摘要】：黄连木(Pistacia chinensis Bunge)是一种重要的木本油料树种,其种子含油量高、出油率高,是制备生物柴油的优质原料。本研究以黄连木种子为试材,利用简并RT-PCR和RACE方法首次成功克隆得到黄连木LEC1转录因子基因的cDNA序列(命名为PcLEC1,GenBank上登记号为HM627254),该序列长988bp,包括741bp完整的开放阅读框,编码247个氨基酸;该基因的核酸序列及其编码的氨基酸序列与已报道其他物种的LEC1基因具有较高相似性;同时,对PcLEC1基因编码蛋白进行生物信息学分析,结果表明,PcLEC1蛋白为亲水性蛋白,pI为6.235,二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,三级结构含有histone fold结构。无信号肽和跨膜区域,定位于细胞核,含有CBFD NFYB HMF功能结构域和NFYB_HAP3保守位点,存在多个潜在的磷酸化位点和其它修饰位点,并具有转录因子活性。另外,通过对黄连木PcLEC1及其他植物来源的LEC1蛋白序列的比对后发现,植物LEC1蛋白的B区序列高度保守,其它区域氨基酸序列差异非常大;进化树分析表明,与黄连木PcLEC1亲缘关系最近的是拟南芥和油菜。在此基础上,开展黄连木PcLEC1基因的原核及真核表达载体构建及表达研究,结果表明,在37℃条件下,1mM IPTG诱导4h,融合蛋白表达量较大;目前已成功获得转PcLEC1基因的烟草植株,转基因烟草种籽的含油量及油质质量分析正进行中。上述研究结果可为黄连木LEC1转录因子基因PcLEC1的应用奠定重要基础,具有广泛的应用前景。

【作者单位】：
【基金】：“十一五”国家科技支撑计划项目“生物质资源高效培育技术研究”(No.2006ABD07A04)资助
【分类号】：S565.9
【正文快照】：

LEcl(L eafy cotyledonl)是胚胎发育过程中关键调控因子。目前已有研究表明，控制胚胎形成以及种子发育过程中的多个方面[’一，而且LEcl可通过影响脂肪酸合成基因表达，进而参与脂肪酸生物合成的调控[1“】。尽管至今己从拟南芥、胡萝卜、玉米、向日葵等植物相继克隆得到LEc

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