微小RNA-1908对肺癌细胞A549细胞周期和靶基因的调控

发布时间：2018-03-20 10:02

  本文选题：微小RNA-　切入点：A细胞　出处：《环境与职业医学》2017年11期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：[目的]探讨微小RNA(microRNA,miRNA/miR)1908对肺癌细胞A549的细胞周期及靶基因的调控作用。[方法]通过慢病毒转染方法,上调A549细胞中miR-1908的表达水平,运用噻唑蓝法和流式细胞技术检测miR-1908对A549细胞增殖、周期和凋亡的影响。应用DIANA-TOOLs及KEGG数据库对miR-1908进行生物信息学分析,探讨其可能参与的信号通路和潜在靶基因。应用RT-qPCR和Western blot技术检测miR-1908对预测靶基因mRNA和蛋白表达水平的调控。[结果]与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起A549细胞G2期阻滞,S期减少(P0.05),对细胞增殖和凋亡无明显影响(P0.05)。miR-1908主要参与MAPK信号通路的调控,蛋白磷酸酶5(PP5)基因为其重要的潜在靶基因。与阴性对照组相比,转染组上调miR-1908表达可引起PP5的蛋白表达增加(P0.05),但其mRNA表达无明显改变(P0.05)。[结论]miR-1908可能通过对PP5基因正向调控或间接调控影响A549细胞周期,研究结果加深了对miRNAs在肺癌细胞中的作用及其机制的理解,并为miRNAs在肺癌中的进一步研究提供线索。
[Abstract]:[objective] to investigate the regulation of cell cycle and target gene by microRNA-miRNA-miRnc-1908 in human lung cancer cell line A549. [methods] the expression of miR-1908 in A549 cells was up-regulated by lentivirus transfection. The effects of miR-1908 on the proliferation, cell cycle and apoptosis of A549 cells were detected by thiazolyl blue assay and flow cytometry. DIANA-TOOLs and KEGG databases were used to analyze the bioinformatics of A549 cells. RT-qPCR and Western blot techniques were used to detect the regulation of miR-1908 on the expression level of predicted target gene mRNA and protein. [results] compared with the negative control group, the expression of mRNA and protein was detected by using RT-qPCR and Western blot. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group resulted in a decrease of P0.05 in G _ 2 arrest S phase of A549 cells, and no significant effect on cell proliferation and apoptosis. MiR-1908 mainly involved in the regulation of MAPK signaling pathway. Protein phosphatase 5 (PP5) gene is an important potential target gene. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group could increase the expression of PP5 protein, but its mRNA expression did not change significantly. [conclusion] miR-1908 may affect the cell cycle of A549 cells through the positive or indirect regulation of PP5 gene. The results of this study have deepened the understanding of the role and mechanism of miRNAs in lung cancer cells and provided clues for the further study of miRNAs in lung cancer.
【作者单位】： 东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金项目(编号:81472939,81673132) 2016年度江苏省普通高校学术学位研究生科研创新计划(编号:KYZZ16_0138) 江苏省科技厅2015年社会发展项目(编号:BE2015719) 南京市科技计划项目(编号:201503006)
【分类号】：R734.2

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