利用酵母单杂交筛选拟南芥AtSTK基因表达调控蛋白的研究

发布时间：2018-03-21 17:29

  本文选题：AtSTK　切入点：启动子　出处：《华北农学报》2017年04期 　论文类型：期刊论文

【摘要】：拟南芥丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因AtSTK的过量表达可以明显提高拟南芥的耐盐性。为进一步研究AtSTK基因表达的调控机制,以拟南芥基因组DNA为模板设计引物,扩增获得AtSTK基因的启动子序列,并构建到报告载体pAbAi,将重组报告载体质粒pAbAi-HYT利用BstbⅠ进行单酶切线性化,转化酵母菌株Y1H Gold,线性化的pAbAi-HYT整合到基因组中。然后,将纯化的拟南芥双链cDNA、pGADT7-Rec载体共转化含有报告载体pAbAi-HYT的酵母菌,将菌液涂布到含有100 ng/m L Ab A的SD/-Leu培养基上进行阳性克隆的酵母单杂交筛选。通过回复鉴定、序列测定,最终筛选获得了可能参与AtSTK基因表达调控的4个拟南芥基因。测序结果表明,酵母单杂交筛选获得的拟南芥基因AT3G32090含有WRKY转录因子保守结构域,为WRKY类转录因子的一员。因此,AtSTK基因的表达很可能接受MAPK信号传导途径中AT3G32090基因编码的WRKY类转录因子的调控,从而影响拟南芥植株的耐盐性。
[Abstract]:Overexpression of serine / threonine protein kinase (AtSTK) gene in Arabidopsis thaliana could significantly improve salt tolerance of Arabidopsis thaliana. In order to further study the regulatory mechanism of AtSTK gene expression, primers were designed using Arabidopsis genomic DNA as template. The promoter sequence of AtSTK gene was amplified and constructed into the report vector pAbAi.Recombinant report vector pAbAi-HYT was linearized by Bstb 鈪，

本文编号：1644843