我国弓形虫Chinese1优势基因型虫株毒力与致病性的比较研究

发布时间：2018-03-23 16:54

  本文选题：弓形虫　切入点：基因型　出处：《安徽医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：背景弓形虫是一种人畜共患,传播广泛,寄生于温血动物有核细胞内的机会性致病原虫。弓形虫感染后可造成宿主的严重危害,引起全身播散感染甚至死亡。弓形虫对宿主损害的靶器官主要为眼,脑、心、肝和淋巴结。已知世界各地流行的弓形虫基因型为Type I、Type II、Type III以及Type12,但是有报道大多数从北美和欧洲的人和动物体内分离到的弓形虫虫株为Type II,其次为Type I和Ⅲ三型。目前对于上述I、II和III型虫株的毒力及致病性研究较为深入,并证实Type I的毒力明显强于Type II/Ⅲ,能致使急性感染小鼠短期内死亡。然而对于中国流行的优势基因型Chinese1(代表虫株Wh3、Wh6)以及Wh3和Wh6虫株在与Type I和Type II/Ⅲ毒力及致病性方面的差异致病力及毒力尚待系统研究。故进一步了解我国弓形虫优势基因型株的致病特点对于本病的防治尤为重要。目的本课题将通过动物体内试验,观察中国优势基因型Chinese1(Wh3、Wh6)的致病力及毒力,描述其对宿主靶器官的病理学损害,并与Type I(RH株)和Type II(PRU株)比较,寻求不同地域不同基因型虫株弓形虫毒力及致病力差异。方法1.Wh3、Wh6,PRU,RH各株速殖子的复苏、获取与保种。2.建立弓形虫感染小鼠模型,A组125只小鼠,分为正常组、RH感染组、Wh3感染组、Wh6感染组、PRU感染组,观察A组感染小鼠发病症状、生存率,鉴定毒力。B组100只小鼠,分组方法同上,分时间段处死小鼠。A组与B组正常组小鼠腹腔注射0.2ml生理盐水作为对照,保持与速殖子感染组所用悬液一致。3.从感染后2天至1个月分时间段(2d,3d,5d,10d和1M)处死小鼠,提取小鼠肝,肺,脑,淋巴结,睾丸组织行HE染色,观察组织病理学变化。4.应用q RT-PCR检测不同时间段留取各组织标本内的弓形虫虫荷。5.应用q RT-PCR技术检测各组脾细胞IL-12、INF-γ、IL-4和IL-10细胞因子水平的变化。结果1.从急性感染小鼠发病症状、死亡时间以及生存率观察,其毒力依次为RH与Wh3相近Wh6PRU。2.HE染色观察各组急性感染小鼠肝,肺,脑,睾丸,淋巴结的组织病理切片,显示弓形虫急性感染小鼠,可对小鼠多个器官造成损害,镜下观察组织病理变化可推测各株毒力及致病性强弱依次为RH与Wh3相近Wh6PRU。3.应用q RT-PCR方法检测肺、肝、脑、睾丸各脏器弓形虫虫荷数量依次为RH与Wh3相近Wh6PRU。通过四组虫荷数据独立样本t检验得出RH组与Wh3组、PRU组与Wh6组虫荷无统计学意义;RH组与PRU组和Wh6组虫荷均有统计学意义,Wh3组与PRU组和Wh6组虫荷均有统计学意义。4.根据现有的q RT-PCR方法测出的脾细胞细胞因子数据,得出Wh6组与PRU组INF-γ和IL-4有统计学差异,PRU组高于Wh6组;Wh6组与PRU组IL-10无统计学意义。结论1.通过观察急性感染我国优势基因型Chinese1(Wh3、Wh6)株小鼠,发现2组小鼠生存率均较低,Wh3组10天内全部死亡,Wh6组15天内全部死亡,组织切片可见2组小鼠肝,脑,肺,睾丸,淋巴结均有不同程度病理学改变,其中Wh3较Wh6病理变化更明显。2.根据急性感染小鼠发病症状、生存率及组织病理切片观察毒力及致病性强弱依次为RH与Wh3相近Wh6PRU。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R382.5

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本文编号：1654339