陆地棉GhVP1基因干扰载体的构建及拟南芥的遗传转化

发布时间：2018-04-10 05:07

  本文选题：GhVP基因　切入点：RNA干扰　出处：《分子植物育种》2017年07期

【摘要】：为进一步探索陆地棉GhVP1基因的功能,本研究以本实验室克隆得到的陆地棉GhVP1基因为模板,经Blast比对,选择长度为347 bp片段作为干涉载体正义、反义序列。利用In-fusion方法构建干涉载体,挑选阳性克隆测序验证,成功构建pBI121-PH::VP1干涉载体。利用农杆菌介导法转化拟南芥,并进行PCR检测,成功获得9株转基因苗,并对获得的T3代转基因拟南芥进行耐盐性分析。结果显示,盐胁迫下,转干涉载体拟南芥的发芽率降低,根长变短,整个生育期的生长受到抑制。研究表明VP基因与植物的耐盐性相关,为进一步研究GhVP1基因及其作用机理提供了参考依据。
[Abstract]:In order to further explore the function of GhVP1 gene in upland cotton, the GhVP1 gene of Upland cotton was cloned in our laboratory as template. The length of 347bp fragment was selected as the sense vector and antisense sequence by Blast comparison.The interference vector was constructed by In-fusion method, and the pBI121-PH::VP1 interference vector was successfully constructed by selecting positive clones and sequencing.Nine transgenic plants were successfully obtained by Agrobacterium tumefaciens mediated transformation of Arabidopsis thaliana and detected by PCR, and salt tolerance of T3 generation transgenic Arabidopsis thaliana was analyzed.The results showed that under salt stress, the germination rate of Arabidopsis thaliana was decreased, the root length was shortened, and the growth of Arabidopsis thaliana during the whole growth period was inhibited.The results showed that VP gene was related to salt tolerance of plants, which provided a reference for further study on GhVP1 gene and its mechanism.
【作者单位】： 中国农业科学院棉花研究所棉花生物学国家重点实验室农业部棉花遗传改良重点开放实验室;
【基金】：河南省基础与前沿技术研究计划项目(142300413232)资助
【分类号】：Q943.2;S562

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：1729772