补肾清毒法对HBV转基因小鼠先天免疫的作用观察
本文选题：慢性乙型病毒性肝炎 + 补肾清毒法 ； 参考：《广州中医药大学》2017年硕士论文
【摘要】：目的:本文通过研究慢性乙肝病毒感染影响先天免疫的两个主要途径:Toll样蛋白受体、RIG-I样受体介导的信号通路,从分子水平探讨先天免疫在HBV转基因小鼠的作用途径,阐明补肾清毒法治疗乙型肝炎病毒可能的机制和作用靶点,探寻慢性乙型肝炎与"肾虚邪伏"病机的科学依据,为补肾清毒法治疗慢性乙型肝炎提供新的思路。方法:将50只HBV转基因小鼠分为五组:补肾清毒汤高、中、低剂量三组,西药组,模型对照组,另取10只正常小鼠做对照组。在SPF级动物房饲养60天后采取肝脏组织,提取肝脏细胞总RNA,逆转录为cDNA,在ABI 7500实时荧光定量基因扩增仪进行相对定量PCR扩增,以GAPDH作为内标基因,采用△△CT方法进行数据分析,比较Toll样蛋白受体、RIG-I样受体介导的信号通路相关分子在各组中的表达情况。结果:1.模型对照组与正常小鼠Toll样蛋白受体、RIG-I样受体介导信号通路的相关分子表达情况:模型对照组与正常小鼠相比,Toll样蛋白受体(TLR-2、TLR-3、TLR-4、TLR-8、TLR-9)mRNA表达相近,差异无统计学意义(P0.05)。模型对照组与正常小鼠相比,RIG-Ⅰ样受体中RIG-ImRNA表达升高,MDA5mRNA表达下降,差异有统计学意义(P0.05);IPS-1mRNA表达相近,差异无统计学意义(P0.05)。模型对照组与正常小鼠相比,效应因子中INF-α、INF-β、TNF-α、TGF-β、IL-6表达相近,差异无统计学意义(P0.05);MCP-1、IL-1β表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。2.补肾清毒汤对HBV转基因小鼠Toll样蛋白受体、RIG-I样受体介导信号通路的相关分子表达情况的影响:补肾清毒汤低、中、高剂量组和西药组与模型对照组相比,TLR-2、TLR-3、TLR-4、TLR-9mRNA表达相近,差异无统计学意义(P0.05);补肾清毒汤中剂量组与模型对照组相比,TLR-8 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。补肾清毒汤中剂量组、高剂量组RIG-I mRNA与模型对照组相比,表达下降,差异有统计学意义(P0.05),且随着补肾清毒汤剂量升高,RIG-ImRNA呈下降的趋势;补肾清毒汤低、中、高剂量组与模型对照组相比,MDA5 mRNA表达相近,差异无统计学意义(P0.05)。西药组与模型对照组相比,MDA5 mRNA表达升高,差异有统计学意义(P0.05)。补肾清毒汤低、中、高剂量组与模型对照组相比,IL-1β、MCP-1mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:1.HBV转基因小鼠肝损害与Toll样蛋白介导的信号通路无关;补肾清毒汤也不影响Toll样蛋白受体表达。2.补肾清毒汤可降低HBV转基因小鼠效应因子IL-1β、MCP-mRNA表达,是补肾清毒汤治疗乙型肝炎的作用靶点之一。3.RIG-I可能通过炎症小体信号通路生成IL-1β、MCP-1,导致HBV转基因小鼠肝损害;补肾清毒汤调节先天免疫的作用机制可能是通过调节这条信号通路,降低炎症反应来实现的。4.基于"肾虚邪伏"病机创立的补肾清毒法治疗HBV转基因小鼠可能不是通过直接杀灭病毒,而是通过改善机体的免疫功能,降低炎症反应,达到保护肝脏的目的。为补肾清毒法治疗慢性乙型肝炎提供科学的依据和新的思路,对临床具有指导意义。
[Abstract]:Objective : To study the expression of Toll - like protein receptor ( TLR - 2 , TLR - 3 , TLR - 4 , TLR - 8 , TLR - 9 ) in HBV transgenic mice . Compared with the model control group , the expression of IL - 1尾 , MCP - 1 mRNA and the expression of IL - 1尾 , MCP - 1 mRNA decreased significantly ( P0.05 ) . Compared with the model control group , the expression of IL - 1尾 and MCP - 1 decreased significantly ( P0.05 ) .
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R259
【参考文献】
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，本文编号：1749029
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