GFP绿色荧光法辅助筛选玉米转基因植株

发布时间：2018-04-15 02:04

  本文选题：玉米 + 转基因植株　； 参考：《玉米科学》2017年02期

【摘要】：利用GFP(Green Fluorescence Protein)绿色荧光蛋白基因作为辅助性筛选标记基因,基因枪法轰击玉米自交系A188和Qi319未成熟胚的胚性愈伤组织。瞬间表达实验结果表明,轰击后GFP表达可持续近20 d,轰击后10 d左右表达量仍保持在较高的水平。采用潮霉素筛选、GFP荧光法鉴定,获得一批玉米转基因植株,转化频率为0.33%~0.47%。分子鉴定和后代分析的结果表明,外源基因已经整合到了玉米基因组中,并能够稳定地表达和遗传。GFP作为辅助性筛选标记基因可以直观、快速和有效地消除玉米遗传转化工作中的假阳性现象。
[Abstract]:The green fluorescent protein (GFP) gene of GFP(Green Fluorescence was used as auxiliary screening marker gene to bombardment embryogenic callus of immature embryos of maize inbred lines A188 and Qi319.The results of transient expression experiment showed that the expression of GFP was sustained for nearly 20 days after bombardment and remained at a high level about 10 days after bombardment.A batch of transgenic maize plants were identified by hygromycin screening and GFP fluorescence method. The transformation frequency was 0.33 and 0.47.The results of molecular identification and progeny analysis showed that exogenous genes had been integrated into the maize genome and could be stably expressed and inherited as auxiliary screening marker genes.The false positive phenomenon in maize genetic transformation is eliminated quickly and effectively.
【作者单位】： 山东农业大学生命科学学院/作物生物学国家重点实验室;
【基金】：国家自然科学基金(31070253) 转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08009-002)
【分类号】：S513

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本文编号：1752009