利用pmi标记基因筛选培育转EaDREB2B基因甘蔗

发布时间：2018-04-16 07:58

  本文选题：甘蔗 + pmi基因　； 参考：《植物研究》2017年03期

【摘要】：利用已构建的植物表达载体prd29a-dreb-hyg,通过酶切连接到含有磷酸甘露糖异构酶基因(pmi)的表达质粒pZMLR14上,构建植物表达载体pDREB-PMI。利用基因枪轰击转化甘蔗愈伤,经过甘露糖筛选,共获51株抗性苗,转化再生频率为4.25%。对转基因植株进行分子检测,结果表明有8株为阳性转基因无性系。氯酚红试验表明标记磷酸甘露糖异构酶基因在转基因株系中均有表达。对转基因T_1代甘蔗植株进行分子检测,结果表明EaDREB2B基因在转基因甘蔗无性系T_1代中稳定遗传。该结果为进一步研究EaDREB2B基因在甘蔗抗旱方面的作用奠定了基础。
[Abstract]:The plant expression vector pDREB-PMIM was constructed by digesting the plant expression vector prd29a-dreb-hyg to the expression plasmid pZMLR14 containing the gene of mannose phosphate isomerase.The callus of sugarcane was transformed by bombardment with gene gun, 51 resistant seedlings were obtained by mannose screening, and the frequency of transformation and regeneration was 4.25%.Molecular analysis of transgenic plants showed that there were 8 positive transgenic clones.Chlorophenol red assay showed that the labeled mannose phosphate isomerase gene was expressed in transgenic lines.The results of molecular detection of transgenic sugarcane plants showed that EaDREB2B gene was inherited steadily in the first generation of transgenic sugarcane clones.The results laid a foundation for further study on the role of EaDREB2B gene in sugarcane drought resistance.
【作者单位】： 井冈山大学生命科学院;福建农林大学农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点实验室;
【基金】：江西省科技厅科技支撑计划项目(20122BBF60135) 江西省教育厅科技计划项目(GJJ13543)~~
【分类号】：S566.1

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