心肌特异性Creg基因条件敲除小鼠的建立及表型分析
本文选题:Creg + 条件敲除 ; 参考:《现代生物医学进展》2016年36期
【摘要】:目的:建立心肌特异性Creg基因敲除小鼠并初步分析其表型。方法:利用订购的Creg两端插入lox P位点(Cregflox/flox)的小鼠与肌型肌酸激酶特异性启动子驱动的Cre重组酶转基因(Ckmm-cre)小鼠交配,获得Cregflox/+/Ckmm-cre小鼠。再利用Cregflox/+/Ckmm-cre小鼠互相交配,获得基因型为Cregflox/flox/Ckmm-cre的心肌特异性Creg基因条件敲除(Creg conditional knockout,Creg c KO)小鼠。用PCR法进行基因型鉴定。用定量PCR及Western Blot检测心肌组织中Creg表达水平。HE染色观察敲除小鼠与同窝野生型对照小鼠心脏大小及形态。检测两组小鼠心电图。用小动物超声评价两组小鼠左心室收缩功能。结果:1经基因型鉴定,成功获得Creg c KO小鼠。2与野生型对照相比,Creg c KO小鼠心脏中CREG在转录及翻译水平表达降低90%以上。3与野生型对照相比,Cre c KO小鼠的心脏大小、形态、心电图及左心室射血分数均无显著差别。结论:成功建立心肌特异性CREG基因条件敲除小鼠,为进一步研究Creg在心脏疾病中的作用和机制提供了有力的工具。
[Abstract]:Objective : To establish the myocardial specificity Creg gene knockout mice and to analyze the phenotype of mice . Methods : To obtain Cregflox / + / Ckmm - cre mice by mating with Cregflox / + / Ckmm - cre mice .
【作者单位】: 沈阳军区总医院心血管病研究所心内科;南京大学模式动物研究中心;
【基金】:国家自然科学基金重点项目(81130072);国家自然科学基金面上项目(81570767,81570265)
【分类号】:R54
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,本文编号:1781059
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