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miR-194-5p靶向调控BCKDHA基因的表达

发布时间:2018-05-01 04:21

  本文选题:miR--p + BCKDHA基因 ; 参考:《畜牧兽医学报》2017年08期


【摘要】:旨在预测并验证调控支链氨基酸分解代谢的限速酶支链α-酮酸脱氢酶复合体(Branched-chainα-ketoacid dehydrogenase complex,BCKDH)中α亚基即BCKDHA基因表达的关键miRNA。本研究利用3个在线软件预测与该基因具有靶标关系的miRNAs。利用荧光定量PCR检测小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化过程中和超表达后关键miRNA与BCKDHA的表达量。结果表明,miR-194-5p是调控BCKDHA表达的一个关键miRNA,其种子序列与BCKDHA3′UTR第190~196位碱基完全互补。MiR-194-5p的表达随分化时间呈下降趋势,而BCKDHA mRNA则呈上升趋势。双荧光素酶报告结果也显示二者具有靶标关系,miR-194-5p下调BCKDHA的表达。超表达miR-194-5p后,BCKDHA的表达显著下调(P0.05)。由此证明,miR-194-5p通过与BCKDHA基因3′UTR结合抑制其表达。
[Abstract]:The aim of this study was to predict and verify the expression of BCKDHA gene in the 伪 -ketoacid dehydrogenase complex Branched-chain 伪 -ketoacid dehydrogenase complex (Branched-chain 伪 -ketoacid complex), a rate-limiting enzyme that regulates the catabolism of branched chain amino acids. In this study, three online software were used to predict the targeted miRNAs. Fluorescence quantitative PCR was used to detect the expression of key miRNA and BCKDHA during and after the differentiation of mouse 3T3-L1 preadipocytes. The results showed that miR-194-5p was a key miRNAs regulating the expression of BCKDHA, and its seed sequence was complementary to the 190,196th base of BCKDHA3'UTR. The expression of MiR-194-5p decreased with the differentiation time, while BCKDHA mRNA showed an increasing trend. The results of double luciferase report also showed that the expression of BCKDHA was down-regulated by miR-194-5p. After overexpression of miR-194-5p, the expression of BCKDHA was significantly down-regulated (P 0.05). It is suggested that miR-194-5p inhibits its expression by binding to BCKDHA gene 3'UTR.
【作者单位】: 山西农业大学动物科技学院;左云县畜牧兽医服务中心;
【基金】:国家自然科学基金项目(31372292)
【分类号】:Q78

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:1827671

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