变形假单胞菌2-酮基葡萄糖酸激酶基因的克
发布时间:2018-05-03 02:36
本文选题:变形假单胞菌 + -酮基葡萄糖酸激酶 ; 参考:《食品科学》2017年16期
【摘要】:采用聚合酶链式反应技术,从2-酮基葡萄糖酸工业生产菌株变形假单胞菌JUIM01中克隆2-酮基葡萄糖酸激酶的全长基因kguK,并在此基础上构建了重组菌株大肠杆菌BL21(DE3)/pET-28a(+)-kguK。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导下,该重组菌株表达了一个特异的分子质量约为36.0 ku融合蛋白,且该蛋白的Western-Blot鉴定结果显示为阳性。生物信息学分析结果表明,该蛋白是一种由305个氨基酸残基组成的亲水性蛋白,定位于细胞质中,存在着与pfkB家族蛋白类似的保守结构域,其二级结构中α-螺旋、延伸链和无规则卷曲所占的比例分别为35.73%、12.79%和51.48%。
[Abstract]:The full-length gene kguK of 2-ketogluconate kinase was cloned from Pseudomonas mutans JUIM01 by polymerase chain reaction, and the recombinant strain BL21DE3 / pET-28awas constructed. Induced by isopropyl- 尾 -Dthiogalactoside, the recombinant strain expressed a specific fusion protein with molecular weight of about 36.0 ku, and the Western-Blot identification of the protein was positive. Bioinformatics analysis showed that the protein was a hydrophilic protein composed of 305-amino acid residues, located in the cytoplasm, with a conserved domain similar to that of the pfkB family protein, and a helix in its secondary structure. The proportion of extended chain and irregular curl were 35.7312.79% and 51.48% respectively.
【作者单位】: 江苏大学食品与生物工程学院;百勤异VC钠有限公司;江南大学生物工程学院;
【基金】:国家自然科学基金面上项目(31571885) 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2012AA022103) 江西省科技计划项目(赣知发[2015]64号) 江西省创新团队建设计划项目(20142BCB24024) 江西省科技平台建设计划项目(2010DTZ01900) 德兴市科技计划项目(德科发[2015]44号)
【分类号】:Q78;Q936
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