大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立

发布时间：2018-05-03 04:25

  本文选题：大肠埃希菌 + ETT毒力岛　； 参考：《动物医学进展》2017年01期

【摘要】：根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验。结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100fg,比常规PCR灵敏度高100倍。利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性。用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致。结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段。
[Abstract]:According to the conserved gene irp2 of Escherichia coli ETT2 virulence island ECs3703 and HPI virulence island in GenBank, a set of LAMP primers were designed for LAMP amplification in the same system. The system was optimized by Mg2 dNTP, internal primer, reaction temperature and reaction time. A LAMP method for simultaneous detection of Escherichia coli ETT2 and HPI virulence islands at 60 鈩，

本文编号：1836970